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海藻糖酶(TREH)真核蛋白蛋白表達(dá)及純化

發(fā)表時(shí)間:2023-05-11
海藻糖酶(TREH)真核蛋白蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

樣品要求:

1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請(qǐng)?zhí)崆皹?biāo)注說(shuō)明。

2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml。

3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。


4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點(diǎn)、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

5、請(qǐng)?zhí)崆罢f(shuō)明任何特殊情況。
布氏肉湯
Skirrow瓊脂
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎(chǔ)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
高氏合成1號(hào)瓊脂培養(yǎng)基
血平板 (成品培養(yǎng)基)
哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基)
改良克氏雙糖培養(yǎng)基
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基
半固體瓊脂
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
苯丙氨酸培養(yǎng)基
葡萄糖銨培養(yǎng)基
尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基
動(dòng)力—硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)
明膠培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)明膠)
克氏雙糖鐵瓊脂
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)
Koser氏枸椽酸鹽肉湯
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基
蛋白胨水 (靛基質(zhì)培養(yǎng)基)
糖發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)
氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)藥典



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