產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6959 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:海豹分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium pinnipedii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
海豹分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21α-溴異shēng huà shì jì容量:RT25克
人癌細(xì)胞;SK-BR-3葉綠速A(-20℃) CHLOROPHYLL c 479-61-8
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甘油 (分子生物級(jí)) Glycerol (for molecular biology, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑
MJ(懸浮) 瘤MiddleBrook7H11瓊脂shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
95-D人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(D-海藻糖)
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]Fluridone1-甲基-3-本基-5-(3-三扶甲基本基)-4(1H)-酮150u高,95%
HBZY-1細(xì)胞,人腎小球髓母細(xì)胞 大鼠埀體瘤細(xì)胞,GH3細(xì)胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2酚(異構(gòu)體混和物) Crqsol 1319-77-3
Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2C.L.E.D培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:200張/盒
NHEM-c M2 adult 正常人表皮素細(xì)胞(NHEM)成年捐獻(xiàn)者(M2培養(yǎng)液中培養(yǎng)) 500,000cells 胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)ADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級(jí)白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-基基氧硅烷NA
NCI-H460(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)胰酶(1:4500)Pancreatin質(zhì)量規(guī)格:酶活1:4500,BR
支原體PCR檢測(cè)試劑盒MYCO枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君Orphenadrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL12A & IL12B Others Human 人 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) β-半乳糖苷酶β-Galactosidase質(zhì)量規(guī)格:700u/mg,羅氏分裝
CatS2 家貓皮膚成纖維樣細(xì)胞脫落酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格:98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0070CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2脫落酸(高)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
海豹分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒CDH12 Others Human 人 CDH12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 丙二酸(AR)Malonate質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
人滑膜細(xì)胞HS氯化錳四水Manganese (II) chloride, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 干酪素Casein質(zhì)量規(guī)格:BR
大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醫(yī)用凡士林Vaseline質(zhì)量規(guī)格:BR
HMy2.CIR人B母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS原釩酸鈉 orthovanadate質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。