產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6983 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma iowae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL葡萄糖氧化酶,英文名或英文縮寫:Glucose oxidase,級別:BR,50u/mg,規(guī)格:100克
NCI-N87 [N87]人細胞 HumanBqNZqNq R.G RqcG.cCS RqcG.ISO Rqc
IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基本-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷,英文名或英文縮寫:GalNAc1-β-PNP,級別:BR,98%,規(guī)格:250克
人神經(jīng)細胞HN鄰硝基乙酰本,英文名或英文縮寫:2'-nitnoacetanilide,級別:BR,規(guī)格:500毫克
NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]GinsenosideRg2人參皂甙Rg225克BR
P19細胞,畸胎癌細胞 人感染HCV細胞,HuH7-HCV細胞 CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×2N,O-雙三硅基酰安 BSc 10416-29-8
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1(≥99.5%,GC) 1975-12-7 100ML 染色劑
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照) D-TyrosineD-β-對羥基本基酸5克BR,99%
肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Linoleicacid 1g/5g/25g/100g原裝 SIGMA L1268
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化苦參堿(標(biāo)準品)Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
長尾綠猴腎細胞;4647穿心蓮內(nèi)酯Andrographolide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準品)Andrographolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
小腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芹菜素Apigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
獼猴皮膚細胞;MMS7 人胚胎性癌細胞,Cates-1B細胞 MDA-MB-453(癌細胞)芹菜素(標(biāo)準品)Apigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)Phenoxyaceti acid salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格:比活性:>200U/mg,BC
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP
MIApaca-2細胞,人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester salt質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。