產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6989 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma pneumoniae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 虎紅1公斤
腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2,4-二肖基酚(劇讀)(易制暴) 2,4-phqnol 1921/8/2
CA46細(xì)胞,人Butts瘤細(xì)胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT細(xì)胞 人肝臟星形細(xì)胞裂解物HHSteCL鈣黃綠素500克
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2葡萄糖酸鹽,英文名或英文縮寫: gluconate,級(jí)別:BR,土豆來源,規(guī)格:10克
CCRF-CEM(人急性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP硅酮 OV-61Silicone OV-61
大鼠骨骼肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLM-肉湯shēng huà shì jì容量:500克
208F大鼠成纖維細(xì)胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纖維細(xì)胞2′-脫氧胞苷-5′-... 2′-Deoxycytidine 5′-triphosphate dis... 102783-51-7 25MG 通用試劑
IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)六二醇 Hqxcqthylqnq glycol 612-12-8
IAR20(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)100克
肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)蛋白胨水培養(yǎng)基Peptone Water Medium
CD300C Others Human 人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸左西替利嗪Levoceitrizine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12鹽酸西替利嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Cetirizine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
KIRREL3 Others Rat 大鼠 KIRREL3 / NEPH2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸雷莫司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)Ramosetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
腸內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)*度酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Etodolac質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
HCPEpiC細(xì)胞,人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 小鼠瘤細(xì)胞,Nb2-11細(xì)胞 人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNAHPA-s cDNA(標(biāo)準(zhǔn)品)Amfebutamone Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 苯(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNAHSkMM NA卡維?。?biāo)準(zhǔn)品)Cavidine質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-羥色胺鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Serotonin hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A月見草油(標(biāo)準(zhǔn)品)Evening primrose oil質(zhì)量規(guī)格:鑒別
NCI-H446[H446]細(xì)胞,小細(xì)胞細(xì)胞 人癌細(xì)胞系,ZR-75-30細(xì)胞 615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712龍血素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Loureirin A 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。