產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7025 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Orf Virus(ORFV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RAW 264.7細胞,小鼠單核巨噬細胞細胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3熒光素100克
CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標簽)5-氧基-2-本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1
PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen
人低分化;GLC-82 [GLC82]血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量:100克
人毛發(fā)基質(zhì)細胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級100G5704-4-1RT
MCF7細胞,人癌細胞 人導(dǎo)管癌細胞,HCC38細胞 髓核細胞生長添加物NPCGS(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3標樣 Lqcd 7439/9/1
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-Chloromercuribenzoicacid對錄高本酸500克AR,99%
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1GDX 203(聚二本多孔小球)NA
PCSK9 Others Rat 大鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羅格列酮(標準品)rosiglitazone hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
原代滑膜皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml苯溴馬?。藴势罚?/span>BENZBROMARONE質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸布替萘芬(標準品)Butenafine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21鹽酸托烷司瓊(標準品)Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Neuro-2A細胞,腦神經(jīng)瘤細胞 人細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸托烷司瓊Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)1酰胺(標準品)Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
人細胞;NCI-H1650氨1汀硫醇二鹽酸Amifostine Thiol Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利游離堿Benazepril Free base質(zhì)量規(guī)格:美國進口
A172人膠質(zhì)母細胞瘤細胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS拉莫三嗪-13C3Lamotrigine-13C3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CRT細胞,神經(jīng)細胞 曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細胞RNAHA-h miRNA5 μgD-半乳糖醛酸甲酯D-Galacturonic acid methyl ester質(zhì)量規(guī)格:美國進口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。