產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7075 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
鴿痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:鴿痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Pigeon Pox Virus(PPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS電泳緩沖液超級無色無混濁液體RTsigma
HuH-7人細胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6
CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色劑
人腎近曲小管上皮細胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸,英文名或英文縮寫:UDPGA,級別:BR,規(guī)格:200u
LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人細胞裂解液 (陽性對照) (L-賴酸)
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F酸性橙II,英文名或英文縮寫:Orange Ⅱ,級別:BR,99%,規(guī)格:25毫克
TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-4-芐基-2-惡坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7
BGC-803 人細胞L-蘇糖醋鈣 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6
97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麥牙提取物細菌學級1KGCOLD
TGFB1 Protein Human 重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人細胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 標簽)維生素B3(標準品)Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106) 6-10B, 人細胞系 Human醋酸環(huán)丙孕酮,醋酸環(huán)丙氯地孕酮Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21醋酸環(huán)丙孕酮(標準品)Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲地孕酮Megestrol base質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
鴿痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人口腔表皮樣癌細胞;KB 大鼠尿道上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)β-淀粉樣蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細胞裂解液 (陽性對照) β-促激素,人β-MSH, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素,猴β-MSH, monkey質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照) Ac-垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。