產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7073 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:派琴蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Perkinsus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
派琴蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
小鼠成纖維細(xì)胞;φ2 小鼠氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺100克
HCT116/L 人耐奧沙利鉑耐藥株減性藍(lán)6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0氫氧化鋁1克
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (IV型膠原酶)
大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)對藍(lán)鈉鹽,英文名或英文縮寫:BCIP, 2Na,級別:AR,60%,規(guī)格:25克
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1 大鼠平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLD(-)乳醋(-20℃) (R)-Lcctctq 1036-41-7
CT-26 WT 小鼠細(xì)胞L-狀腺速內(nèi);L-狀腺安內(nèi);3,5,3′,5′-四典狀腺-L-原安 L-Thyroxinq wo7iumsclt;3,3′,5,5′-Tqtrciodo-L-thyroninq wo7ium sclt pqntchydrctq;wo7ium lqvothyroxinq;Lqvothyroxinq wo7ium;qltroxin;Thyroxqvcn; 2416-62-3
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 香檸檬油,英文名或英文縮寫:Bergamot Oil,級別:AR,99%,規(guī)格:10毫克
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-12083-91-2N,N-二甲基基硅胺N,N-Dimetxyltrimetxylsilylamine
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 巖白菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)Bergenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21巖白菜素Bergenin質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmatine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0025AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿Palmatine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
Hepa 1-6, 小鼠細(xì)胞 細(xì)胞,RCC-krause細(xì)胞 SK-HEP-1(細(xì)胞)鹽酸黃柏堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Phellodendrine chloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
派琴蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芴(標(biāo)準(zhǔn)品)Fluorene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(HPLC)
人二倍體細(xì)胞;HELβ-胡蘿卜素(標(biāo)準(zhǔn)品)β-Carotene質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106)胡麻屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Sesamoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-H015人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL葫蘆巴堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Trigonelline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712 小鼠腎實質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL葫蘆素B(標(biāo)準(zhǔn)品)Cucurbitacin B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品