產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7074 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:美人魚發(fā)光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Photobacterium damselae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
美人魚發(fā)光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,A172細(xì)胞 Tb 1 Lu細(xì)胞,蝙蝠肺細(xì)胞4'-羥基鹽酸曲唑酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口4'-Hydroxy Trazodone HCl
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 Human鹽酸伐倫克林標(biāo)記15N3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3
CD2 Others Mouse 小鼠 CD2 / LY37 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 內(nèi)酰胺伐倫克林質(zhì)量規(guī)格:美國進口Varenicline Lactam
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基OPCM羥基伐倫克林質(zhì)量規(guī)格:美國進口Hydroxy Varenicline
IGFBP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-氧基匹格列酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口Pioglitazone N-Oxide
IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) RAFFINOSEPENTAHYDRATE綿子糖,五水超級100G17629-30-0RT
L6565 小鼠克隆細(xì)胞系丁醋縮水甘油酯 96% (R)-Glycidyl butyrctq 60426-6-0
HEC-1-B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-B human endomeial adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-蘇安醋;L-異赤絲藻安基醋 L-Thrqoninq;L-β-xy7noxy-2-cMinobutyric ccid;(2S,3R)-2-cMino-3-xy7noxybutyric ccid;(2S,3R)-(-)-Thrqoninq 7-19-2
LGALS1 Protein Rat 重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白WESTERNMAX,HRPCHROMKIT,MOUSE辣根酶發(fā)光檢測試劑盒,小鼠01 KitCOLD
小鼠心肌細(xì)胞(MCM)(1×106) QGY-7701, 人細(xì)胞 Human108-01-0N,N-二甲基(XZ)N,N-Dimetxylethanolamine
小鼠紅細(xì)胞;MEL煙酰胺二核苷酸鈉鹽Nicotinamide hypoxanthine dinucleotide salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MMP9 Others Human 人 MMP-9 / CLG4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-(1,3,4-Thiadiazolyl)煙酰胺N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21β-煙酰胺單核苷酸β-Nicotinamide mononucleotide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HA Others Influenza B 乙型 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)丙孕酮Cyproterone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
JM 人急性T細(xì)胞細(xì)胞15β-羥基醋酸環(huán)丙孕酮15β-Hydroxy Cyproterone Acetate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
美人魚發(fā)光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 Mouse槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercitrin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EM1 Others Human 人 EM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-谷甾醇β-Sitosterol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人惡性色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]光甘草定Glabridin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )鬼臼(標(biāo)準(zhǔn)品)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞鬼臼(95%)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。