產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7101 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Prevotella intermedia
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
NCI-H209(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Hematinchloride血晶素25克IND
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]草酸酰胺乙酯 Ethyl oxamate,98% 617-36-7 25G 通用試劑
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4熒光速;熒光橙 Fluorqscqin;Dixy7noxyfluorcnq;Tqtrcoxyphthclophqnonqcn hydridq;C.I. 45350 1931-7-2
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (T-4)-雙(D-葡萄糖酸-κO1,κO2)-鋅,英文名或英文縮寫:Zinc gluconate,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5U
人肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硅酮 OV-225SILICONE OV-225
非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]鹽酸鳥糞素,英文名或英文縮寫:Guanine HC1,級(jí)別:BR,935ug/mg,規(guī)格:100KU
GZMH Others Human 人 Granzyme H 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 言醋西替利嗪 Cqtirizinq xy7nochloridq 83881-2-1
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)RNASEA,PANCREATIC核糖核酸酶A*白色至淺棕色粉末FROZENsigma
人腦微內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 )STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術(shù)級(jí)5MG9013-20-1Frozen
肺平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-metxylumbelliferone 5g/10g/25g/100g原裝 Sigma M1381
CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 桃葉珊瑚苷Aucubin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甲硝唑Metronidazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16 人皮膚基底細(xì)胞癌,TE 354.T細(xì)胞 Acc-2(涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞)甲硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Metronidazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人急性單核細(xì)胞細(xì)胞;THP-1乙酰哈巴苷8-O-Acetylharpagide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃決明素Chrysoobtusin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) MG132,蛋白酶體抑制劑MG-132質(zhì)量規(guī)格:>98%,proteasome抑制劑
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BPD184352 (CI-1040)PD-184352 (CI-1040)質(zhì)量規(guī)格:>99%,MEK1/2抑制劑
NCI-H520細(xì)胞,人肺鱗癌細(xì)胞 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞 CM-R023大鼠管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2-脫氧-D-葡萄糖2-Deoxy-D-glucose質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
QGY-7701(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2坎地沙坦Candesartan質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細(xì)胞生長培養(yǎng)基 500mlRuxolitinib(INCB018424) phosphateINCB018424) phosphate質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK1/2抑制劑