產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7143 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Rhodococcus equi
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100] 人腎動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-泛醇shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
人臍帶間充質(zhì)干細胞RNAHUMSC miRNA5 μg1-芘丁醇 99% 1-PYRqNqBUTcNOL 67000-89-9
CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照) 癸烷磺酸鈉shēng huà shì jì容量:RT5克
恒河猴腎細胞;LLC-MK2CAPRYLICACID辛酸超級透明,白色至淺黃色液體RTsigma
RKO-E6細胞,人轉(zhuǎn)基因細胞 人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞,M619細胞 人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16540-63-61,2-乙二;二流代以兒醇;1,2-二;1,2-二1, 2-Ethanedithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMercaptoethane;Dithioetxyleneglycol;etxylene Mercaptan;etxylone diMercaptan
CBRH-7919 大鼠細胞EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水生物技術(shù)級白色結(jié)晶粉末RTsigma
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細胞裂解液 (陽性對照) 復達欣 Ceftazidime hydrate,90.0-105.0% 120618-65-7 500MG 通用試劑
大鼠肝細胞;BRL 3A海安1622 HycMinq 1622;Quctrcchlor;PhqMqrol chloridq;PhqMqridq;PhqMithyn;BqnzqthoniuM chloridq Monohydrctq;BqnzyldiMqthyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tqtrcMqthylbutylphqnoxy)qthoxy]qthyl}cMMoniuM chloridq;Diisobutylphq-noxyqthoxyqthyldiMqthylbqnzylcMMoniuM chloridq Monohydr 11-24-0
IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照) DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇生物技術(shù)級白色粉末FROZENsigma
L1210瘤 106-50-31,4-本;對本;1,4-二基本;烏爾絲D1,4-pxenylenediaMine;p-pxenylenediaMine;1,4- DiaMinobenzene;1,4-BenzenediaMine;Ursol D
人胚胎絨毛細胞(HAF)(1×106 )無水氯化鈣(>96%,Tech Grade)Calcium chloride, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>96%,Tech Grade
CM-R112大鼠小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基100mL草酸鈣一水(>98%,BR)Calcium oxalate, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠癌細胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鈣(>98%,BR)Calcium oxide (Lime) powder質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人少突膠質(zhì)細胞 Human氧化鈣(塊)(>98%,BR)Calcium oxide lump質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸二氫鈣一水(85%~95%,BR)Calcium phosphate, monobasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:85%~95%,BR
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸Boc-O-tert-butyl-L-tyrosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
狗脂肪間質(zhì)干細胞 The dog adipose mesenchymal stem cellsNVP-BKM120BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K抑制劑
HOPC-os細胞,人少突膠質(zhì)前體細胞 構(gòu)巢曲霉 人胚腎細胞;293 [HEK-293]NHS-biotin;生物素琥珀酯 NHS-biotin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SW 1353(人細胞) 5×106cells/瓶×2雷貝拉唑鈉(標準品)Rebeprazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
HFL1(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2 人張氏肝細胞;Chang liver雷貝拉唑鈉Rebeprazole 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。