產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7145 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Rickettsia mooseri
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23,4-二羥基shēng huà shì jì容量:RT5克
HCC1937(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯(lián) 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量:RT100克
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Myoglobinfromeinoneeskeletalmuscle肌球素25克BR,2-6u/mg
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞59-92-73-(3,4-二羥基本)-L-酸;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羥基本酸; β-[3,4-二羥本基]L-初油基酸3-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Levodopa; 3-xy7noxy-L-tyrosine; 2-AMino-3(3,4-dixy7noxypxenyl)propanoic acid; β-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Bendopa; Deadopa;
CL-0001293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:RT25毫升
SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系 腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞,SW 13細(xì)胞 TT(人細(xì)胞)言醋羅哌卡應(yīng)有關(guān)物質(zhì)A隊照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2增氧靈,英文名或英文縮寫:Calcium peroxide,級別:AR,99%,規(guī)格:5克
MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肉桂醇shēng huà shì jì容量:0.5毫升
大鼠細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍(lán)靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent
H4(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CM-M051小鼠子宮頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815 小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL耐爾藍(lán)A(>65%,BS)Nile blue A質(zhì)量規(guī)格:>65%,BS
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-丙氨酸Z-β-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CBZ-D-谷氨酸α-芐酯Z-Glu-OBzl質(zhì)量規(guī)格:>98%
CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-芐氧羰基-L-酪氨酸Z-Tyr-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
CNE1, 人細(xì)胞系 草魚吻端細(xì)胞,ZC-7901細(xì)胞 SW480 [SW-480](人細(xì)胞)Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。