產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7156 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:豬霍亂沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella choleraesuis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
豬霍亂沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
BT474細胞,導管瘤細胞 人,JEG細胞 人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μgACRYL/BIS19:1,PREMIXEDPOWDER酰胺/甲叉 19:1粉末超級白色結(jié)晶粉末RTsigma
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細胞;B95-8β-紫羅蘭同 4-(2,6,6-Trimqthyl-1-cyclohqxqnyl)-3-butqn-2-onq 79-77-6
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 40%度尿素水1米
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;C918(酚紅)亮綠瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100克
NRP2 Others Human 人 Neuropilin 2 / NRP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 3001-15-84,4-二聯(lián)本4,4'-Diiodobipxenyl
人毛細胞裂解物HHDPCL磺芐西林(標準品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定SULBENICILLIN
EB-3[EB3]細胞,人樣Butt瘤細胞 人腎透明細胞腺癌細胞,786-O細胞 前脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)乙酰螺旋霉素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Acetylspiramycin
兔間變表皮鱗株;VX2三氯氨鉑酸鉀質(zhì)量規(guī)格:>95%Potassium trichloroammineplatinate(II)
SPI2 Others Mouse 小鼠 SPI2 / HAI2 人細胞裂解液 (陽性對照) 西索米星(標準品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Sisomicin
CL-0111HL-7702(人肝正常細胞)5×106cells/瓶×2脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide
大鼠星形膠質(zhì)細胞RA依來藍R500KU
GAD1 Others Human 人 GAD67 / GAD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸1酯 ()-Bornyl acetate,97% 5655-61-8 25G 通用試劑
恒河猴腎細胞;RM-3乳糖一水 Lcctosq Monohydrctq 2989-81-1
COS-1細胞,SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞 人細胞,PA319細胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mLACVA偶氮二基戊酸500毫克CP
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)57-55-6沒食子酸酯Propyl Gallate; Gallic acid propyl ester; PG;
豬霍亂沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒LncaP, 人細胞 腹水瘤,SRS-82細胞 TOV-112D(人上皮性細胞)馬來酸阿森那平Asenapine Maleate質(zhì)量規(guī)格:>99%
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1ZSTK474ZSTK474;ZSTK-474質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型PI3K亞型抑制劑
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷Luteolin 7-O-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
人細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]STA-9090;STA9090Ganetespib質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 赤芝酸DLucidenic acid D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%