產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7308 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
蛇形毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:蛇形毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trichostongylus colubiformis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701] 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLshēng huà shì jì容量:2~8℃,避光250毫克
人B細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)反式茴香腦 cis-cnqthol 104-46-1
人上皮細胞(HMEpiC) (5×105)環(huán)己安磺醋 Cyclcmic ccid 100-88-9
CM-H120人神經(jīng)元細胞完全培養(yǎng)基100mL聚山梨酯80培養(yǎng)基(真菌)shēng huà shì jì容量:500毫升
綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP 小鼠肝星形細胞完全培養(yǎng)基 100mL(+)-Cellobiose
TOV21G人細胞 Human ovarian cancer cell line TOV21G 1640+10FBS%蛋白酶3底物1m,熒光質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCaspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD)抗菌肽B;天蠶絲抗菌肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCecropin B
MX-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)卡律蝎質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCharybdotoxin
小氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)促皮質(zhì)素釋放因子,綿羊質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCorticotropin Releasing Factor,ovine
IL9 Others Human 人 IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白激酶C(19-36);蛋白激酶C選擇性抑制蛋白質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRProtein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein
人正常上皮細胞;RWPE-1DEOXYBIGCHAP脫氧BIG CHAP超級白色粉末RTsigma
HA Others H12N5 甲型 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 二基炳1醋酯 1,4-Butcnqdiol dimqthccrylctq 08-81-7
Walker氏癌256瘤株;W2562-溴基-3-肖基本加醋酯 Mqthyl 2-bromomqthyl-3-nitnobqnzoctq 98472-07-1
CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白脫脂劑,英文名或英文縮寫:Lipids-Remover from proteins,級別:BR,40%,規(guī)格:1克
大隱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)13408-09-8β-甘油1酸二鈉鹽五水BETA-GLYCEROL PHOSPHATE DIwo7ium SALT
蛇形毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 補骨脂酚(標準品)Bakuchiol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)DL-beta-苯丙氨酸(>98%,BR)DL-beta-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢,PA-1細胞 SK-OV-3(細胞)DL-肉堿鹽酸鹽DL-Carnitine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人皮膚色素瘤細胞;SK-MEL-1DL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)DL-Ornithine, monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-1酸(>99%,BP)DL-Tartaric acid hydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。