產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7391 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
鴿子源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:鴿子源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
幼蚊細(xì)胞;C6/364-丁氧基鄰苯二甲腈(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)4-Butoxyphthalonitrile
SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,3-二亞氨基異吲哚啉(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)1,3-Diiminoisoindoline
人羊膜細(xì)胞;WISH4,5-二氯鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)4,5-Dichlorophthalonitrile
CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-十二烷氧基鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)4-Dodecyloxyphthalonitrile
人尿道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-叔丁基杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[4]arene
RBE細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞,ECA細(xì)胞 人羊膜上皮細(xì)胞鹽酸阿扎司瓊質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRAzasetron HCl
M14(人色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氮卓斯汀堿質(zhì)量規(guī)格:>97%Azelastine base
NHEK.f pooled Pellet 正常人表皮角質(zhì)細(xì)胞團(tuán)塊(少年者,混合來源) > 1 mio.cells 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM桿菌肽鋅質(zhì)量規(guī)格:≥60U/mg,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Bacitracin Zinc
CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿魏酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>99% ferulic
IL22RA1 Others Canine 狗 IL22RA1 / IL22R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿魏酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%(干品),標(biāo)準(zhǔn)品 ferulic
IL18BP Others Mouse 小鼠 IL18BP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) H295EstersilH295硅酯500毫升BR,99%
MTT細(xì)胞活力和增殖檢測(cè)試劑盒MTT4-羌基本加醋丁酯;隊(duì)羌基本加醋丁酯;泥泊金丁酯 Butyl 4-xy7noxybqnzoctq;4-xy7noxybqnzoic ccid butyl qstqr;Butobqn;Nipcgin;Butylpcrcbqn;Butyl chqMosqpt;Butyl pcrcsqpt 1994/6/8
CD2 Others Canine 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,8-二氮雙環(huán)[5.4.0... 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene (≥... 6674-22-2 25ML 通用試劑
人上皮細(xì)胞;Ca SkiTRIS-TAPS-EDTA(TTE)POWDERBLENDTTE緩沖液,10X 粉末包超級(jí)1 PackRT
雜交瘤(B類);C3110D2E11 細(xì)胞,Lncap細(xì)胞 H4-II-E-C3細(xì)胞,大鼠肝細(xì)胞瘤6160-65-21,1-硫代羰基二咪唑1,1'-Thiocarbonyldiimidazole
鴿子源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒GHR2 金黃地鼠肋骨來源細(xì)胞三七皂苷R2(S型)(標(biāo)準(zhǔn)品)S-Notoginsenoside R2質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-M030小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL無水醋酸鋅Zinc acetate質(zhì)量規(guī)格:AR
HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞5-氟吲哚-2-羧酸5-Fluoroindole-2-carboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,原裝進(jìn)口
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0911 人皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3-環(huán)戊基-L-丙氨酸3-Cyclopentane-L-alanine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基CEpiCMSEA-0400SEA0400質(zhì)量規(guī)格:>98%,鈉離子-鈣離子交換子(NCX)抑制劑
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。