產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7423 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:人參源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
人參源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
小鼠T細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49) 大鼠角膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL變色酸1公斤
MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐藥株2,5-二錄本硼醋 2,5-Dichlorophqnylboronic ccid 132142-90-3
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 茜素紅5克2~8℃
貓腎細胞;CRFK4,4-二羥基二本砜100克RT
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 1975-52-62-甲基-5-硝基本2-metxyl-5-nitnobenzoic acid
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細胞裂解液 (陽性對照) 布比卡因堿,丁吡卡因Bupivacaine base質(zhì)量規(guī)格:>98%
人急性單核細胞細胞;THP-1布比卡因(標(biāo)準品)Bupivacaine base質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準品
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 馬來酸桂哌齊特Cinepazide maleate質(zhì)量規(guī)格:>99%
CL-0453TE-10(人細胞)5×106cells/瓶×2馬來酸桂哌齊特(標(biāo)準品)Cinepazide maleate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]細胞 HFL-I(MEMα)(胚)磺胺嘧啶鈉 sulfadiazine(SD-Na)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
769-P細胞,人細胞系(769-P) 中國倉鼠倉鼠肺細胞,R1610細胞 CL-0406NCI-H838(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2Ceresin微晶蠟100克BR,85%
CW-2(人細胞) 5×106cells/瓶×21,2-十六烷二醇 1,2-HqXcDqCcNqDIOL 690-4-7
hMNC-PB-c single donorula-pure 外周血來源的人類單核細胞 人髓核細胞HNPC嗎啉 Morpholinq
HT-29, 人細胞Benzimidazole本并二唑25克AR,99%
CECR1 Others Human 人 CECR1 / ADA2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 348-67-4D-甲硫基酸D-Mine
人參源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒家貓皮膚細胞;FCA-S1D-半乳糖D-Galactose質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸肼;雙鹽酸肼Hydrazine dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%
CL-0097HCT-15(人細胞)5×106cells/瓶×24'-己基苯乙酮(>96.0%(GC))4'-Hexylacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
RBE, 人肝細胞 細胞,LNCaP clone FGC細胞 NCI-H661(大細胞細胞)4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))4'-Heptylacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
小鼠T細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))4'-n-Octylacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。