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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

神經(jīng)絲蛋白 英文名稱： neurofilame protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： NF  Tetracaine 中文名：丁卡因 分子式：C15H24N2O2

神經(jīng)絲蛋白 英文名稱： neurofilame protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： NF  Tetracaine  94-24-6 中文名：丁卡因 分子式：C15H24N2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：

神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體 英文名稱： nerve growth factor  receptor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： NGFR  3'-Hydroxygynuramide II  1401093-57-9 中文名： 分子式：C42H83NO6

神經(jīng)生長(zhǎng)因子 英文名稱： nerve growth factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： NGF  3'-Hydroxygynuramide II  1401093-57-9 中文名： 分子式：C42H83NO6 度：% 關(guān)鍵詞： 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-Hydroxychimaphilin  33253-99-5 中文名：3-羥基梅笠草素 分子式：C12H10O3
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Zosuquidar；LY335979LY-335979質(zhì)量規(guī)格：>98%

Peng EBV-轉(zhuǎn)化細(xì)胞Iso利巴韋林（利巴韋林雜質(zhì)G）Iso Ribavirin (Ribavirin Impurity G)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

家兔*間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC利巴韋林5'-單1酸二鋰鹽Ribavirin 5'-Monophosphate, Dilithium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

MCF-7 [MCF7], 癌細(xì)胞系1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯1-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

組織細(xì)胞瘤細(xì)胞;U937 [U-937] 大鼠外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3-羧氨基利巴韋林鹽酸鹽Viramidine 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
AXR1 Others Human  AXR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴夫定Brivudine質(zhì)量規(guī)格：度≥99.0%，含量≥98.5%

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Brivudine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LTPA小鼠*癌細(xì)胞 LTPA mouse pancreatic cancer cells 1640+10%FBS卡巴他賽Cabazitaxel質(zhì)量規(guī)格：≥99%

NRG1 Protein Human 重組 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)米托蒽醌Mitoxantrone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR

PC-3M(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)拉莫三嗪 Lamotrigine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Dregeoside Ga1  中文名： 分子式：C49H80O17 度：93.0% 兔粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝

H7N9 病毒PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Dregeoside Aa1  中文名： 分子式：C49H78O17 度：97.5% 兔肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rabbit HGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝

Tigogenin  中文名：劍麻皂素 分子式：C27H44O3 度：98.0% 兔透明質(zhì)酸(rabbit HA) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝

Adynerigenin β-neritrioside 中文名： 分子式：C42H64O17 度：95.0% 兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝

Tenacissoside G  中文名：通關(guān)藤苷G 分子式：C42H64O14 度：% 兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T