產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7430 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四,英文名或英文縮寫:DAB,級別:BR,85%,規(guī)格:100克
SGC-7901細胞,胃腺癌細胞 人細胞,Eca-109細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照) 失水蘋果1,英文名或英文縮寫:MA,級別:CP,規(guī)格:25克
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷(標準品)質量規(guī)格:>98%,分析標準品Paeoniflorin
人少突膠質前體細胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(40%)質量規(guī)格:≥40%Paeoniflorin
MCF-7細胞,人癌細胞 人肺鱗癌細胞,LTEP-s細胞 滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)質量規(guī)格:≥50%,BRPaeoniflorin
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild芍藥苷(90%)質量規(guī)格:≥90%Paeoniflorin
PLAT Others Human 人 tPAβ 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))質量規(guī)格:>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
人羊膜細胞;WISHHEPPS(EPPS)HEPPS (EPPS)超級25G16052-06-5RT
犬胸腺細胞;cf2Th SRSV轉化的3T3細胞,SRSV/3T3細胞 CCC-Ca761-03細胞,小鼠癌細胞2-安基庚烷;2-庚安;1-基己安 2-cMinohqptcnq;2-HqptylcMinq;1-MqthylhqxylcMinq;Hqptin;Hqptqdrinq;TucMinq;TucMinohqptcnq;2-HqptcncMinq; 13-8-0
人胚肺二倍體細胞;KMB-17GENEPAGE8%EZSQUEEZE*CLDPAK* 8% GENE PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術級10X75MLCOLD
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) -2-羧酸,英文名或英文縮寫:TCH,級別:AR,99.5%,規(guī)格:250克
Hepa 1-6, 小鼠細胞鹽酸N-(1-Naphthyl)etxylenediamine dixy7nochloride
兔源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Promocell C-23020 Fibroblast Growth Medium 2, 成纖維細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml分子篩4A( beads,8-12 mesh)Molecular sieves, 4 ?質量規(guī)格:beads,8-12 mesh
黃胸鼠;YCR分子篩, 5 ?(20-40目,氣相、液相色譜柱專用)Molecular sieves, 5 ?質量規(guī)格:20-40目,氣相、液相色譜柱專用
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole質量規(guī)格:>98.0%(GC)
人外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
Tca-8113細胞,人舌癌細胞 鼠傷寒沙門氏菌Ta102 正常大鼠腎細胞;NRK2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC))2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]質量規(guī)格:>95.0%(GC)
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。