產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64660 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64660 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time
PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
10. 尿道細胞系統(tǒng)S-乙?;虼憠A(>99%,醫(yī)藥級)質量規(guī)格:>99%,醫(yī)藥級S-Acetylthiocholine iodide
CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2N-丁二酸,S-乙?;叶减?span>(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRS-Acetylthioglycolic acid N-hydroxysuccinimide ester
人癌細胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL水楊醇(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRSalicyl alcohol
Pcc4 小鼠SB3-18質量規(guī)格:BRSB3-18
SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 魯斯考皂苷元(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Ruscogenin
KYSE150 食管鱗癌西米替?。藴势罚┵|量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Cimetidine
ME-180頸表皮癌細胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS阿德福韋/阿德福韋酯質量規(guī)格:>99%,可用于細胞培養(yǎng)Adefovir dipivoxil
HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白吲哚菁綠質量規(guī)格:>94%,BSIndocyanine Green
小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 細胞株 Human靛藍質量規(guī)格:BSIndigotin
大鼠腎小管上皮細胞RRTEpiC甲基藍質量規(guī)格:ARMethyl blue
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
AsPc-1細胞,轉移*癌細胞 正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質量規(guī)格:0.99
HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質量規(guī)格:分析標準品,98.6%
Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質量規(guī)格:分析標準品
心肌細胞-心室cDNAHCF-av
cDNA丁(B9)(標準品)Daminozide質量規(guī)格:分析標準品
NCI-H446[H446]細胞,小細胞細胞 人癌細胞系,ZR-75-30細胞 615小鼠T細胞性瘤株;L7712鹽酸-Na-本甲酰-L-精酸乙酯,英文名或英文縮寫:BAEE,級別:BR,98%,規(guī)格:10克
小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)3-(三基硅基)溴炳決 3-BROMO-1-(TRIMqTHYLSILYL)-1-PROPYNq 3800-42-8
IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照) ETHANOLANxy7noUS,DENATURED1試劑級透明液體RT不sigma
人骨骼肌成肌細胞裂解物HSkMMLN-芴甲氧羰基-D-天冬酰,英文名或英文縮寫:Fmoc-D-Asn-OH,級別:特,98%,規(guī)格:100克
細小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸test111