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帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：HEL299細(xì)胞
中文名稱：人紅白細(xì)胞細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：紅白細(xì)胞

培養(yǎng)基：IMDM

狀態(tài)：懸浮

單位:

貨號(hào)：E01138

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。

注意事項(xiàng)：
HEL299細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit     Clevidipine butyrate  中文名：丁酸氯維地平  分子式：C21H23Cl2NO6  度：98.0%

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來那替尼  Neratinib(HKI-272)  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) VTGELISA試劑盒鯉魚卵黃蛋白原規(guī)格：96T/48T

甲基原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Methyl Protodioscin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 ，英文名： Pro-ANP ELISA Kit

纖細(xì)薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gracillin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠球蛋白E(IgE)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T

鹽酸育亨賓  Yohimbine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)試劑盒 Human leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,LRG1 ELISA Kit

鹽酸育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）  Yohimbine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatIerleukin2,IL-2ELISAKit大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲磺酸酚妥拉明  Phentolamine mesilate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR CASPASE-9蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25

甲磺酸酚妥拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)  Phentolamine mesilate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

維羅非尼,RG7204  Vemurafenib,PLX 4032  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,B-Raf突變抑制劑 小鼠前腦啡肽(PENK)ELISA試劑盒 ，英文名： PENK ELISA Kit

白花前胡素E  Praeruptorin E  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit 96T/48T

白花前胡甲素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Praeruptorin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠脂多糖/內(nèi)(LPS)試劑盒 Rat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K14-戊氧基苯(>98.0%(GC))4-Amyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-丁氧基苯(>98.0%(GC))4-Butoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

猴源細(xì)胞4,4'-二羥基二苯(>98.0%(GC))4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,2'-二羥基二苯(>98.0%(GC))2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫(>98.0%(GC))4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
HEL299細(xì)胞P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨細(xì)胞)薯蕷皂甙質(zhì)量規(guī)格：BR，含量≥95.0%Dioscin

CL-0288MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品Diosgenin

CLEC4F Others Rat 大鼠 CLEC4F / CLECSF13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 薯蕷皂素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRDiosgenin

人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟cDNAHPA-v cDNAD-半胱氨酸鹽酸鹽一水質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BR，一水物D-Cysteine hydrochloride monohydrate

BCaP-37細(xì)胞，人癌細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系,MA-104細(xì)胞 腸內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進(jìn)口)質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進(jìn)口Calpain Inhibitor II(ALLM)