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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：HHFK細(xì)胞
中文名稱：人毛囊角質(zhì)細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：毛囊；角質(zhì)細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0772

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit  3-Acetylcoumarin  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)血清、組織等）   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4 

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)全血）   Lactic acid (LD) test case (whole blood)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

乳酸（LD）（血清、組織）檢測(cè)   Lactic acid (LD) (whole blood) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙?；愣顾?/span>  分子式：C11H8O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

乳酸（LD）（全血）檢測(cè)   Lactate dehydrogenase (LDH) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3
D-纈氨醇   D-Valinol  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanβ-hexosaminidaseAELISAKit 96T/48T

L-苯甘氨醇   L-Phenylglycinol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)試劑盒 Rat Angiotensin conveing enzyme 2,ACE2 ELISA Kit

BOC-L-脯氨醇   BOC-L-Prolinol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 英文名稱Ratf-β-HCGELISAKIT大鼠游離β絨毛膜激素(f-β-HCG)規(guī)格：96T/48T

絲氨醇,2-氨基-1,3-   2-Amino-1,3-propanediol   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 革蘭氏陰性細(xì)菌基因組DNA化試劑盒20

N-甲基-D-天門冬氨酸  N-Methyl-d-Aspartic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitHBXIP人病毒X蛋白結(jié)合蛋白規(guī)格：48T/96T

APMSF(進(jìn)分)  p-APMSF, Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分,sigma A6664 小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： UU-Ab ELISA Kit

(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇   (1R,2S)-(+)-cis-1-Amino-2-indanol  質(zhì)量規(guī)格：0.98 大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA檢測(cè)試劑盒RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit 96T/48T

N-BOC-D-色氨醇  N-Boc-D-tryptophanol   質(zhì)量規(guī)格：BR,>98% 人促素受體(GsaR)試劑盒 Human GsaR ELISA Kit

DL-苯甘氨醇   2-Phenylglycinol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘氨酸-L-亮氨酸   Glycyl-L-leucine  質(zhì)量規(guī)格：0.98 HRP標(biāo)記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
小小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-c)(5×105) MG-63, 人細(xì)胞 Human泊洛沙姆407質(zhì)量規(guī)格：M.W12000，進(jìn)口BASF分包Polyethylene-polypropylene glycol

大鼠肺泡上皮細(xì)胞RPAEpiC1酸長(zhǎng)春質(zhì)堿質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCatharanthine hemitartrate

ENPP2 Others Mouse 小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸甲氯芬酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Meclofenoxate HCl

HEL2 人胚胎(女)醋酸甲地孕酮質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,USP31Megestrol Acetate

CM-R067大鼠腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸甲地孕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Megestrol Acetate
HHFK細(xì)胞HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 尼扎替丁質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP31Nizatidine

CL-0444SNU-5(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2羧甲基纖維素質(zhì)量規(guī)格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.sCarboxymethyl cellulose

LCK Others Human 人 Lck Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟達(dá)拉賓質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BRFludarabine

人平滑肌細(xì)胞RNAHBSMC miRNA5 μg氨魯米特（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aminoglutethimide

WISH細(xì)胞，羊膜細(xì)胞 人細(xì)胞,A-427細(xì)胞 rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞氟他胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP29Flutamide
注意事項(xiàng)：
HHFK細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。