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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：H2.35細(xì)胞
中文名稱：小鼠肝細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：小鼠

來(lái)源：肝；SV40轉(zhuǎn)化；雌性；BALB/c

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01266

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Ganciclovir  82410-32-0  中文名：更昔洛韋  分子式：C9H13N5O4    HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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四螨嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)  Clofentezine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6% 犬黃體生成素(LH)試劑盒 Canine Leinizing Hormone,LH ELISA Kit

四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)  Clofentezine solution  質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4% 犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T

四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)  Clofentezine solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% 犬肌酐(Cr)試劑盒 Canine Creatinine,CR ELISA KIT

萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  Carboxine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9% 犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T

環(huán)己醇(Standard for GC,>99.0%(GC))  Cyclohexanol  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.0%(GC) 犬肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒 Dog Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit

敵草索(標(biāo)準(zhǔn)品)   Dacthal  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Canine Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit

1-氯辛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)  1-Chlorooctane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit

十二烷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dodecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC) 犬基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit

鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體: 5％HNO3)  Bismuth solution  質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體: 5％HNO3 犬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)  Copper solution  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 犬基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 Dog Maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit
神經(jīng)絲蛋白   英文名稱：   neurofilame protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF  Tetracaine  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2 

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱：   neurofilame protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF  Tetracaine  94-24-6  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體   英文名稱：    nerve growth factor  receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NGFR  3'-Hydroxygynuramide II  1401093-57-9  中文名：  分子式：C42H83NO6 

神經(jīng)生長(zhǎng)因子   英文名稱：    nerve growth factor    規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NGF  3'-Hydroxygynuramide II  1401093-57-9  中文名：  分子式：C42H83NO6  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒     3-Hydroxychimaphilin  33253-99-5  中文名：3-羥基梅笠草素  分子式：C12H10O3
H2.35細(xì)胞Dregeoside Ga1  中文名：  分子式：C49H80O17  度：93.0%  兔粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dregeoside Aa1  中文名：  分子式：C49H78O17  度：97.5%  兔肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Tigogenin  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3  度：98.0%  兔透明質(zhì)酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Adynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H64O17  度：95.0%  兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Tenacissoside G  中文名：通關(guān)藤苷G  分子式：C42H64O14  度：%  兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit
注意事項(xiàng)：
H2.35細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。