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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：肝Kuffer細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：肝Kuffer細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1250

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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硬脂酸25克  CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9規(guī)格：48T/96T

2303-1-7間紫;間酚紫;間磺酞M-Cresol purple  細(xì)菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑20次

檸檬酸鈉shēng huà shì jì容量：25克  rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土槿D Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%) 115028-67-6 5MG 通用試劑  豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

依思明藍(lán) IscMin bluq;Brillicnt sky bluq 5G;C.I. 42700 134-86-3  Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)ELISA試劑盒
腺苷脫酶shēng huà shì jì容量：RT1克  GoatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit山羊化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(EggYolk)(蛋黃卵1脂)  人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

肌酸25克  小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰酶siuin-1(SI1)免疫試劑盒 Mouse NAD-depende deacetylase siuin-1,Si1 ELISA Kit

醋鋇 98+% Bcrium chromctq 1094-40-3  胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織抗體(MALT Lymphoma Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MALT Lymphoma Ab ELISA Kit

metxYLEnepLUE100XDNASTAIN次甲基藍(lán)DNA染色液超純級(jí)100ML7220-79-3RT  MouseNervegrowthfactor,NGFELISA試劑盒小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
順丁希二酸鈉250毫克2～8℃  英文名稱MouseconnectivetissuegrowthfactorELISAKit小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(ctgf)規(guī)格：96T/48T

135145-90-32,5-二錄本硼酸2,5-Dichloropxenylboronic acid  冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒50次

小牛浸膏粉shēng huà shì jì容量：RT，避光100克  Rat17-ketosteroids,17-KSELISA試劑盒大鼠17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-溴-5-肖基 2-Bromo-5-nitnopyridinq 4487-29-6  小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1,4-奈二酚，英文名或英文縮寫：1,4-Dixy7noxy，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：1毫克  Rat aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒
肝Kuffer細(xì)胞諾納德P40500克  細(xì)菌氧化酶定性檢測(cè)試劑盒20次

73049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone  RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：500毫升  豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用試劑  Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒

異炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1  HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
注意事項(xiàng)：
肝Kuffer細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。