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細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：骨細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：骨細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1293

注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
骨細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長(zhǎng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

乙酸正酯shēng huà shì jì容量：RT1克  HumanGelsolin,GSELISA試劑盒人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(抑胃肽)  組織同酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

VISIGLOPLUSAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD  HumanMyosinlightChain，MLCELISAKit人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-聯(lián)本硼醋，98% Biphqnyl-3-boronic ccid 21-92-  兔去甲(NA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

URIDINE尿苷超純級(jí)  Human platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒
無(wú)水碳酸鉀1克RT  Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISA試劑盒人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

106-36-5正丙酯Propyl propionate  ELISAKitsICAM-1豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1規(guī)格：48T/96T

曲拉通x-200shēng huà shì jì容量：25克  HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十二烷基基溴化銨 Dodecyltrimethylammonium bromide,≥98% 1119-94-4 10G 通用試劑  人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

異拂烷相關(guān)物質(zhì)B Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound B;2,2,2-TrifluoroqthyldifluoroMqthyl qtqr 1882-48-9  豬Na+/K+-ATP酶(Na/K ATPase)免疫試劑盒 Pig Na+/K+-ATPase ELISA kit
十四酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Myristic acid，級(jí)別：BR，50%，規(guī)格：25克  小鼠雌二醇(E2)免疫試劑盒 Mouse Esadiol,E2 ELISA Kit

NBT 200mg/1g Amresco分裝  內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF165)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGF165 ELISA Kit

SDS10%SDS溶液超純級(jí)100MLRT  MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4  ELISAKitOVAsIgG豚鼠卵清蛋白特異性IgG規(guī)格：48T/96T

Carbolfuchsin石炭酸品紅1克FMP，84%  Chickenadrenomedullin,ADMELISAKit雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
骨細(xì)胞腦浸粉(牛)5克2～8℃，避光  小鼠N端前腦素(-proBNP)免疫試劑盒 Mouse -proBNP ELISA KIT

(TCA)(三)  蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)ELISA試劑盒 ，英文名： SNAIL1 ELISA Kit

鏈霉蛋白酶shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光5克  MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-氧基本全;隊(duì)氧基本全;隊(duì)茴香全;大茴香全 4-Mqthoxybqnzcldqhydq;p-cniscldqhydq;cnisic cldqhydq;cubqpinq;Mqthyl-p-oxybqnzcldqhydq 2013/11/2  ELISAKienin兔腎素規(guī)格：48T/96T

聚丙二醇2000shēng huà shì jì容量：RT，避光5克  GoatIerleukin4,IL-4ELISAKit山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。