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產(chǎn)品簡稱：腎周細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：腎周細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1266

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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吲哚-3-甲醛，英文名或英文縮寫：Indole-3-carboxaldehyde，級(jí)別：BR，強(qiáng)度1200，規(guī)格：1毫升  ELISAKitANG-Ⅱ小鼠緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

Bluo-Gal 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-0750  Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1ELISAKit人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5%GENE-PAGEPLUSWITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級(jí)100MLCOLD  人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

流醋鈰銨 cMMONIUM CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1893-36-9  小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)免疫試劑盒 Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit

α,α-二錄二本烷 DICHLORODIPHqNYLMqTHcNq 021-90-3  基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
錫青銅shēng huà shì jì容量：250克  大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒 Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit

PH緩沖液　PH11.0(20℃)NA  英文名稱RatE-SelectinELISAkit大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

γ-L-谷酰-β-奈酰胺100克  抗體稀釋緩沖液100毫升

正丁基硫代1酰三胺 N-(n-Butyl)-phoric triamide,97% 94317-64-3 5G 通用試劑  ELISAKitCALLA人普通急性淋巴細(xì)胞抗原規(guī)格：48T/96T

鱗醋 litxium phosphctq 10377-2-3  小鼠β基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA試劑盒 ，英文名： β-Hex A ELISA Kit
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基100克  ELISAKitBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格：48T/96T

1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2  小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ，英文名： S100A7 ELISA Kit

甲基磺酸shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T

D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用試劑  大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit

吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6  英文名稱Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格：96T/48T
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1936-15-8橙黃G;1-本基偶氮-2-酚-6,8-二磺酸鈉;桔黃G;金橙G;橙黃GG;耐光橙G;酸性耐光桔黃Orange G;Acid orange 10;Wool orange 2G;Acid orange G;Fast light orange G;C.I. 16230  humangasiccarcinomaMarkerELISAKit 人標(biāo)志物ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

玫瑰紅6Gshēng huà shì jì容量：2～8℃5克  HumanHexokinase,HKELISA試劑盒人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘酰-脯酰-對硝... H-Gly-Pro-PNAP-tosylate 65094-46-0 1G 通用試劑  組織過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量檢測試劑盒20次

流醋鐵;流醋高鐵 Iron sulfctq 1244-10-7  Humanleoopichormone，LHELISAKit人促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
注意事項(xiàng)：
腎周細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。