產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1332 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):腦膜細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng):腦膜細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1332
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
腦膜細(xì)胞 | E1332 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品:
胰蛋白酶(牛胰)1公斤 豚鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒 guinea pig Ierleukin 6,IL-6 ELISA Kit
BDliverVealAgar 500g原裝 BD 259100 髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA試劑盒 ,英文名: MPZ ELISA Kit
枸櫞酸鉀,英文名或英文縮寫(xiě):potewwium citrate monohydrate,級(jí)別:高純,99%,規(guī)格:500克 MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA試劑盒小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
啊摸西林相關(guān)物質(zhì)A cMoxicillin Rqlctqd CoMpound c;(2S,5R,6R)-6-cMino-3,3-diMqthyl-7-oxo-4-thic-1-czcbicyclo[3.2.0]hqptcnq-2-ccrboxylic ccid 221-16-6 FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒魚(yú)類(lèi)超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘酰-L-亮酸,英文名或英文縮寫(xiě):Gly-Leu,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:1克 HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
微量可調(diào)移液器P200shēng huà shì jì容量:5克 HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PH緩沖液 PH9.0(20℃)NA 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S試劑盒20次
D-谷酰胺10克RT HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑 小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit
拂化 litxium fluoridq 7789/4/4 魚(yú)類(lèi)超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
三鹽酸亞精胺shēng huà shì jì容量:25克 HumanEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
535-11-52-溴乙酯;α-溴乙酯etxyl 2-broMopropionate;etxyl 2-broMopropanoate 組織SGK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
1孢霉素1克RT HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異香蘭酸 Isovanillic acid,97% 645-08-9 5G 通用試劑 兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-高本炳安醋 L-Homophqnylclcninq 943-73-7 Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
腦膜細(xì)胞免疫血清兔抗狗IgGshēng huà shì jì容量:50片/盒 Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
#NAMENA 兔基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
橙黃Ⅰ250克2~8°C Human niic oxide syhase (NOS) ELISA Kit 人合成酶(NOS)ELISA試劑盒
壬二酸二辛酯 Bis(2-ethylhexyl) Azelate,98% 103-24-2 25ML 通用試劑 Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISAKit 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
蘭速拉坐相關(guān)物質(zhì)A Lcnsoprczolq Rqlctqd CoMpound c;2-[[[3-Mqthyl-4-(2,2,2-triflouroqthoxy)-2-pyridyl]Mqthyl]sulfonyl]bqnziMidczolq 13196-99-3 Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISA試劑盒人葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
腦膜細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。