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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:100管/96樣
  • 貨號:BK-S01359
  • 發(fā)布日期: 2020-10-27
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-S01359
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 %
CAS編號
別名 NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒
分子式
是否進口

基本信息:

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

微量法

100/96

BK-S01359

商品介紹:

測定意義
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)

測定原理:

NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

特點:
(1)應(yīng)用廣泛 產(chǎn)品僅用于科研
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速

實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
封閉用正常山羊血清工作液  Ribavirin  36791-04-5  中文名:利巴韋林  分子式:C8H12N4O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

吩嗪甲酯   1g  Trenbolone acetate  10161-34-9  中文名:  分子式:C20H24O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

分泌型白細胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式:C21H20O10 

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A   英文名稱:   Pulmonary surfacta associated protein type A   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SP-A  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式:C16H14O3  度:99.0%

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A(SP-A)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5
兔補體蛋白3elisa試劑盒   兔補體蛋白3試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔補體蛋白3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔補體蛋白3試劑盒、兔補體蛋白3 elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個月。  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  114772-54-2  中文名:  分子式:C14H10BrN  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔補體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名:  分子式:C7H5ClN2O2  度:98.0%

兔半胱酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒   兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒、兔半胱酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個月。  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  114772-54-2  中文名:  分子式:C14H10BrN 

兔半胱酸蛋白酶抑制劑C   英文名稱:   Rabbit Cystatin C   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   CSTC  4-Oxododecanedioic acid  中文名:  分子式:C12H20O5 

兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名:  分子式:C13H15N3O2
5-Formyl-2-furylboronic acid  中文名:  分子式:C5H5BO4  度:98.0%  激酶(PK)測試盒   可見分光光度法   50管/48樣           

1-Methyl-aminomethyl naphthalene  中文名:  分子式:C12H13N  度:98.0%  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II試劑盒(琥珀酸-輔酶Q還原酶)

Terbinafine  中文名:特比萘芬  分子式:C21H25N  度:98.0%  蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒(測血清、組織)(紫外比色法)

N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine  中文名:  分子式:C21H14ClFIN3O  度:98.0%  超微量Ca-ATP酶測定試劑盒

3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  中文名:  分子式:C13H9ClFNO3  度:98.0%  超微量Ca2+Mg2+-ATP酶測定試劑盒(比色法)
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法2-Benzylsuccinic acid  3972-36-9  中文名:  分子式:C11H12O4    人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit              

3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  143527-70-2  中文名:  分子式:C17H23NO5    人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名:阿托伐他汀鈣  分子式:C33H35FN2O5    人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester  143615-00-3  中文名:  分子式:C11H15NO3    人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Desloratadine  100643-71-8  中文名:脫羧氯雷他定  分子式:C19H19ClN2    人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

聯(lián)系方式
手機:13564080845