產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE01225 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 小腸;SV40小T抗原轉(zhuǎn)化 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠小腸細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱:STC-1
種屬:小鼠
來(lái)源:小腸;SV40小T抗原轉(zhuǎn)化
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE01225
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠小腸細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Uzarigenin digitaloside 中文名: 分子式:C30H46O8 魚激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Uzarigenin 中文名: 分子式:C23H34O4 魚類激素釋放激素 ELISA. 96T/48T
ucralose 中文名:三氯蔗糖 分子式:C12H19Cl3O8 魚類狀腺原酸(T3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tryptophan 中文名: 分子式:C11H12N2O2 魚類皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Troxerutin 中文名:曲克蘆丁 分子式:C33H42O19 魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 1,5-Pentanediol diacrylate 中文名: 分子式:C11H16O4 度:98.0%
組織N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 中文名:1,3-雙(4-氨苯氧基)苯 分子式:C18H16N2O2 度:98.0%
組織NLK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene 5089-22-5 中文名:1,4-雙(2-苯并惡唑基)萘 分子式:C24H14N2O2 度:98.0%
組織NEK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138195-49-0 中文名: 分子式:C29H36O17 度:95.0% 關(guān)鍵詞:
組織NEK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 1,6-Anhydro-β-D-glucose 中文名:1,6-脫水-β-D-葡萄糖 分子式:C6H10O5 度:98.0%
Epiandrosterone 中文名:表雄酮 分子式:C19H30O2 度:98.0% 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Androstanolone 17-benzoate 中文名:雄諾龍苯甲酸酯 分子式:C26H34O3 度:98.0% 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rosuvastain Calcium 中文名:瑞舒伐他汀鈣 分子式:C22H28FN3O6S 度:98.0% 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ambrisentan 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4 度:98.0% 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Propacetamol 中文名:鹽酸丙帕他莫 分子式:C14H21ClN2O3 度:98.0% 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白elisa試劑盒 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒、小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠小腸細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Amlexanox 68302-57-8 中文名:氨來(lái)呫諾 分子式:C16H14N2O4
豚鼠球蛋白Eelisa試劑盒 豚鼠球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠球蛋白E試劑盒、豚鼠球蛋白Eeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Amitraz 33089-61-1 中文名:雙甲瞇 分子式:C19H23N3
豚鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Amitriptyline 中文名:鹽酸阿米替林 分子式:C20H24ClN 度:98.0%
豚鼠球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T Amitriptyline 549-18-8 中文名:鹽酸阿米替林 分子式:C20H24ClN
豚鼠球蛋白E 英文名稱: Immunoglobulin E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgE Allyl cinnamate 中文名:肉桂酸烯丙酯 分子式:C12H12O2 度:98.0%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。