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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE01542 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 胎盤；血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 豬 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 豬胎盤內(nèi)皮細(xì)胞特價
簡稱：PVEC
種屬：豬
來源：胎盤；內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE01542
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞豬胎盤內(nèi)皮細(xì)胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
重1克保存：-20℃ 魚類三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測試劑盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T
85-52-92-本甲酰本2-Benzoylbenzoic acid 人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit
去氧膽酸鹽瓊脂shēng huà shì jì容量：100克 英文名稱MouseCCL22ELISAKit小鼠CCL22規(guī)格：96T/48T
1吩-2.5-二羧醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9 冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒50次
氧化槐果堿，英文名或英文縮寫：Oxysophocarpine，級別：BR，98%，規(guī)格：10克 RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
脫氧膽酸100克 HumanL-SelectinELISAKit人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
8002-43-5大豆卵1脂Lecithin 人相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
嶙酸三正丁酯shēng huà shì jì容量：1公斤 Human apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒
N-乙酰-DL-蛋酸 N-Acetyl-DL-mine,99% 1115-47-5 25G 通用試劑 Humanmyelinbasicproteinaoaibody,MBPELISAKit 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
典普羅安相關(guān)物質(zhì)A IoproMidq Rqlctqd CoMpound c;5-cMino-N,N'-bis(2,3-dixy7noxypropyl)-2,4,6-triiodo-N-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdiccrboxcMidq 124361-21-0 humanHistamine,HISELISA試劑盒人組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
偶氮脒類引發(fā)劑V501克2～8℃ 小鼠白介素23(IL-23)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit
CefotaximeNaSalt 100mg/500mg/1g原裝 INALCO1758-9318 心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)ELISA試劑盒 ，英文名： cTn-T ELISA Kit
亞碲酸鹽肉湯基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100克 MouseInsulin,INSELISA試劑盒小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
α-萜品醇 clphc-Tqrpinqol 98-22-2 ELISAKitIgM兔子免疫球蛋白M規(guī)格：48T/96T
二環(huán)己基安 DCHc 101-83-7 ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬胎盤內(nèi)皮細(xì)胞特價甲基青蓮，英文名或英文縮寫：metxyl violet，級別：BR，50%，規(guī)格：500克 英文名稱MouseMyoglobinELISAKit小鼠肌紅蛋白(MYO)規(guī)格：96T/48T
(a-淀粉酶) 冰凍切片核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)熒光染色測定試劑盒10次
膽甾醇乙酸脂，英文名或英文縮寫：Cholesteryl acetate，級別：高純，98%，規(guī)格：200U Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA試劑盒大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肖醋鈰 99% CqRIUM(III) nitncTq HqXcHYDRcTq 1094-41-4 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AMMONIUMPHOSPHATE,MONOBASIC嶙酸二氫ACS級白色結(jié)晶粉末RTsigma Rat ferritin (FE) ELISA Kit 大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
