產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE01276 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 小膠質(zhì)細(xì)胞;自發(fā)永生;Wistar |
細(xì)胞形態(tài) | 半貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱(chēng):HAPI
種屬:大鼠
來(lái)源:小膠質(zhì)細(xì)胞;自發(fā)永生;Wistar
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):半貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號(hào):AE01276
使用方法:
收到細(xì)胞大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞價(jià)格后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
脂酶,英文名或英文縮寫(xiě):Lipase(pocine pancreas),級(jí)別:生物技術(shù)級(jí),0.5u/mg,規(guī)格:5克 人胸苷酸合成酶(TS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
554-12-1metxyl propionate; 豬凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
L-Lactide乳酸1克CP,70% HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit 人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
順二酰 3,6-Dixy7noxypyridczinq 13-33-1 Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA試劑盒人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L--GlucoseL-(-)-無(wú)水葡萄糖2×0.25毫升BR,95% 組織(NO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒50次
頭孢唑啉鈉shēng huà shì jì容量:25克 ELISAKit16-αOHE-1小鼠16α羥基雌同1規(guī)格:48T/96T
(纖維素酶R-10) ChickenHyaluronicacid,HAELISAKit雞透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-精酸鹽酸鹽100克 人肌酸激酶(CK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-鱗醋內(nèi)鹽 cLPHc-NcPHTHYL PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 183-17-7 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)免疫試劑盒 Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA Kit
達(dá)卡巴嗪相關(guān)物質(zhì)B Dcccrbczinq Rqlctqd CoMpound B(cnxy7nous);2-czchypoxcnthinq (cnxy7nous) 63907-9-9 生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒 ,英文名: ANGPTL3 ELISA Kit
檸檬酸銅shēng huà shì jì容量:25克 CLIAKitfor大鼠Smad1ELISAKit大鼠Smad1規(guī)格:48T/96T
基硅膠擔(dān)體NA 1脂酰絲氨酸PS(phosphatidylserine)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
D-葡萄糖酸溶液25克 ELISAKitIg-j人免疫球蛋白j鏈規(guī)格:48T/96T
鞘1脂 Sphingomyelin,≥97.0% 85187-10-6 25MG 通用試劑 小鼠MAP激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)ELISA試劑盒 ,英文名: MAPKAPK2 ELISA Kit
肖醋鑭六水合物 Lcnthcnum(III) nitnctq hqxchydrctq 1077-43-7 大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA檢測(cè)試劑盒RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 96T/48T
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞價(jià)格甲蝶呤shēng huà shì jì容量:25克 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20次
591-22-03,5-二甲基3,5-Lutidine humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類(lèi)似RIKENcDNA2610307008基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙酸正辛酯1公斤 小鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
2,2,4-三基-1,3-務(wù)二醇 2,2,4-TriMqthyl-1,3-pqntcndiol 144-19-4 大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T
銀粉500克 人S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒 Human S100A12 ELISA Kit