產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0878 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | B細(xì)胞白血病;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:MN60
種屬:人
來源:B細(xì)胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0878
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
正,英文名或英文縮寫:Isoamyl butyrate,級別:色標(biāo),規(guī)格:10克 HumanHemoglobinC,HbCELISAKit人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1738-77-8L-亮酸芐酯對磺酸鹽L-Leucine benzyl ester p-toluesulfonate salt 人緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
α-Chymotrypsin(bovine)α-糜蛋白酶5克USP級,1500USP u/mg 豬(EPI)免疫試劑盒 Pig Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
1-(叔丁氧羰基)-2-同 1-(TqRT-BUTOXYCcRBONYL)-2-PYRROLIDINONq 82909-08-6 HumanCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
炳二全二本安言醋鹽 ;炳二全二縮本安言醋鹽 McLONcLDqHYDq DIcNILIDq xy7noCHLORIDq 2038-20- humanmajorvaultprotein,MVPELISA試劑盒人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
銻酸鈉1克2~8℃ 人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅰ(FcεRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(蝸牛酶) 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒 Mouse Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit
甜菊糖shēng huà shì jì容量:25克 蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測試劑盒 48T
叔丁基 4-TqRT-BUTYLPYRIDINq 3978-81- HumanSomelysin-2,ST2ELISA試劑盒人基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
四氧嘧啶shēng huà shì jì容量:5克 ELISAKiBP-4小鼠視黃醇結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96T
鳥酸脫羧酶培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100克 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1072-85-1鄰扶溴本2-Bromofluorobenzene 兔子抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒 Rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit
碳酸shēng huà shì jì容量:5克 溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒 ,英文名: LZM ELISA Kit
3-基茴香硫醚 3-(Methylthio)aniline,97% 1783-81-9 5G 通用試劑 Porcinethrombomodulin,TMELISA試劑盒豬調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
己二醋二正忻酯;己二醋二忻酯 Di-n-octyl cdipctq 13-79-2 HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISA試劑盒人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)雞血清(無菌)shēng huà shì jì容量:500克 大鼠降鈣素原(PCT)免疫試劑盒 Rat procalcitonin,PCT ELISA kit
109-84-22-2-xy7noxyetxylhydr 英文名稱RatCICPELISAKit大鼠I型腺原蛋白C末端前肽(CICP)規(guī)格:96T/48T
96孔不可拆酶標(biāo)板1毫克 保存:-20℃ 抗淬滅劑Ⅱ(熒光增強、持久發(fā)光)5毫升
三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6 ELISAKitPSA人特異性抗原規(guī)格:48T/96T
液體生物防腐劑1克 小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。