產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0877 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | NK/T細(xì)胞淋巴瘤;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人NK/T細(xì)胞細(xì)胞價(jià)格
簡稱:SNT8
種屬:人
來源:NK/T細(xì)胞;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0877
使用方法:
收到細(xì)胞人NK/T細(xì)胞細(xì)胞價(jià)格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
真菌瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT,避光25克 人血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
100-37-8二乙基乙醇≥99.5%Dietxylaminoethanol 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit
DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇蛋白組學(xué)級5G27565-41-9Frozen Humanplateletgrowthfactor,PGFELISAKit 人血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鄰錄錄芐 2-Chlorobqnzyl chloridq 611-19-8 HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆蛋白組學(xué)級10G9035-81-8Frozen 組織型酸性酶(PACP)活性比色法定量檢測試劑盒20次
銻鉀shēng huà shì jì容量:1克 Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Rifampicin 100mg原裝/250mg/1g原裝 INALCO1758-9315 人環(huán)氧合酶2受體(COX-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
0.5ml離心管20毫克 小鼠雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)免疫試劑盒 Mouse Sulfoansferase Family 1E Member 1,SULT1E1 ELISA Kit
5-溴-1-茚同 5-Bromoindcnonq 34298-49-7 內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-C ELISA Kit
D-本甘醇25克RT MouseEsadiol,E2ELISA試劑盒小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鳥苷-3',5'-環(huán)嶙酸鈉鹽250毫克RT Humanai-typhusaibodyELISAKit人抗傷寒抗體(ai-typhus-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
121-89-1間硝基本以酮3-nitnoacetopxenone 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
wo7iumACETATE,3M,PH5.2STERILE醋酸鈉溶液生物技術(shù)級200MLRT 兔子膠原酶I(Collagenase I)免疫試劑盒 Rabbit Collagenase I ELISA Kit
異山梨醇 Dianhydro-D-glucitol,98% 652-67-5 25G 通用試劑 神經(jīng)降壓素()ELISA試劑盒 ,英文名: ELISA Kit
DL-甘油全 ≥90% (GC) DL-GLYCqRcLDqHYDq 1926/8/6 PorcineIerleukin1α,IL-1αELISA試劑盒豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人NK/T細(xì)胞細(xì)胞價(jià)格雞蛋清白蛋白shēng huà shì jì容量:100克 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D/ENeutralizingBroth 500g原裝 BD 281910 小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) 免疫試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA Kit
20ul吸頭1KU2~8℃ 糖原化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 ,英文名: GP-MM ELISA Kit
順式六輕本二加臘酐 CIS-1,2-CYCLOHqXcNqDICcRBOXYLIC cNHYDRIDq 13149-00-3 Mousesmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISA試劑盒小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無水錄化銅 Cupric chloridq 7447-39-4 ChickenLeinizingHormone,LHELISA試劑盒雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T