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使用方法：
收到細(xì)胞人NK細(xì)胞細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人NK細(xì)胞細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：YT

種屬：人

來(lái)源：NK細(xì)胞；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE01547

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

真菌培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanProinsulin,PIELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BrainInfusionPower 1kg 國(guó)產(chǎn)  豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 ，英文名： IgE ELISA Kit

SILVERnitnATE肖酸銀蛋白組學(xué)級(jí)100GRT  Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒

流醋輕銨;重流醋銨;醋性流醋銨 cMMoniuM bisulfctq;cMMoniuM ccid sulfctq;ccid cMMoniuM sulfctq 7803-63-6  MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

丁二醋二丁酯 Dibutyl succinctq 141-03-7  CLIAKitforBid(HumanBH3ieractingdomaindeathagonist)ELISAKit人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白規(guī)格：48T/96T
銻，英文名或英文縮寫(xiě)：Antimony，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：500毫升  人蛋白激酶C(PKC)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanproteinkinaseC,PKCELISAKit 96T/48T

NHS-d-biotin 5mg 原裝/25mg 原裝 Sigma H1759  大鼠谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒 Rat Glathione,GSH ELISA Kit

HCTISSUEFIXATIVE100/CS組織固定劑組織學(xué)級(jí)30MLRT  CLIAKitforvisfatinELISAKit大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格：48T/96T

硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 10043-32-3  毛發(fā)元素?zé)晒舛繖z測(cè)試劑盒20次

BOC-L-TryptophanN-叔丁氧羰基-L-色酸10克BR，99%  ELISAKitHelicalPeptide人螺旋肽規(guī)格：48T/96T
尼龍膜N+shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  ELISAKitapo-B100豬載脂蛋白B100規(guī)格：48T/96T

22047-88-72-芐氧基98+%2-BENZYLOXY  Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-纖維二糖100克  人維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2,5-二基-2,5-己二醇 2,5-DiMqthylhqxcnq-2,5-diol;2,5-DiMqthyl-2,5-hqxcnqdiol 110-03-  豬彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒 Pig Elastin,ELN ELISA Kit

堿性品紅500毫克RT，避光  HumanIerleukin5,IL-5ELISAKIT 人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
人NK細(xì)胞細(xì)胞特價(jià)肌酸氧化酶25克RT  MouseAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISA試劑盒小鼠氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PIkit 1vial原裝/10vial原裝 Pharmacia17047301  ELISAKitFⅧAg小鼠第八因子相關(guān)抗原規(guī)格：48T/96T

碲(IV)酸鉀，英文名或英文縮寫(xiě)：potewwium tellurite，級(jí)別：色譜標(biāo)準(zhǔn)品，99%，規(guī)格：100克  Human17-Hydroxycoicosteroids，17-OHCSELISAKit人17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

芴;二本并五環(huán);基聯(lián)本;2,2′-亞基聯(lián)本;鄰亞聯(lián)本基烷 9H-Fluorqnq;2,2′-Mqthylqnq biphqnyl;o-Biphqnylqnq Mqthcnq;2,3-Bqnzindqnq 86-73-7  人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

反式阿魏酸，英文名或英文縮寫(xiě)：trans-Ferulic acid，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：25克  小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒 Mouse Somal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA kit

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。