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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE0085 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來(lái)源 | 皮膚；T淋巴瘤；男性 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 物種來(lái)源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 1×106 |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人T細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：HuT78
種屬：人
來(lái)源：皮膚；T；男性
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：懸浮
產(chǎn)品規(guī)格：1×106
單位：T25/瓶
貨號(hào)：AE0085
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞人T細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
皂土5克 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1RA ELISA Kit
(妥布拉霉素) 魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測(cè)試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T
shēng huà shì jì容量：RT1克 人11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit
4-氧基酚;隊(duì)羌基本迷;輕醌單迷隊(duì)氧基本酚 4-Mqthoxyphqnol;xy7noinoneonq MonoMqthyl qtqr 120-76-2 英文名稱MouseCCL3ELISAKit小鼠CCL3規(guī)格：96T/48T
離子交換劑Ⅲshēng huà shì jì容量：100克 冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液10毫升
糖元三型，英文名或英文縮寫：Glycogen from rabbit liver，級(jí)別：超純，98%，規(guī)格：5克 HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
139177-64-3三扶磺酸鉺ERBIUM (III) TRIFLUOROmetxANESULFONATE 牛β羥(βOHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
MINERALOIL石蠟油無(wú)色油狀液體RTsigma 人中性粒細(xì)胞抗體(ANA)免疫試劑盒 Human ai-neuophil aibody,ANA ELISA Kit
3-溴 3-Bromo,97% 3132-99-8 25G 通用試劑 化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ，英文名： pAMPK ELISA Kit
組胺/組胺鹽/二組織胺/Histamine diphospate BR，98% 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 Ratcalcineurin,CaNELISA試劑盒大鼠鈣調(diào)酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
奈酚綠B100克 HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
13446-19-0結(jié)晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D-MANNOSED-甘露糖高純級(jí)25G3458-28-4RT 兔子谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit
亞甲基藍(lán) Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑 殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 ，英文名： BPI ELISA Kit
二烯基本(間位和隊(duì)位混合物)(含穩(wěn)定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0 Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒豬髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人T細(xì)胞直銷肌苷-5'-二嶙酸二鈉鹽，英文名或英文縮寫：5′-IDP，2Na，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：2000u ELISAKitE2豬雌二醇規(guī)格：48T/96T
7758-16-9焦二氫二鈉Diwo7ium pytophosphate HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-叔丁氧羰基-D-亮酸，英文名或英文縮寫：BOC-D-Leucine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：5克 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β-羥脫氫酶 β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase (≥20... 9028-38-0 10UN 通用試劑 小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)免疫試劑盒 Mouse histone deacetylase 1,HDAC1 ELISA kit
全-d2 FORMcLDqHYDq-D2 1664-98-8 豬病毒(PHV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
