產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0462 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 套細胞淋巴瘤;男性 |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人套細胞直銷
簡稱:Mino
種屬:人
來源:套細胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0462
使用方法:
收到細胞人套細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷5克RT HumanapoproteinA5,apo-A5ELISAKit人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
堿性酶(-20℃)NA 人γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國藥典級100G73-32-5RT 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)免疫試劑盒 Rabbit Maix Metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit
3-羥基-9,10-二甲氧... 3-hydroxy-9,10- dimethoxypterocarpan (... 73340-41-7 10MG 通用試劑 上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 ,英文名: ESA ELISA Kit
兒茶速 DL-CcTqCHIN 88191-48-4 PorcineKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISA試劑盒豬角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘇木素,英文名或英文縮寫:Hematoxylin,級別:超純,98%,規(guī)格:10克 Ratbrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
12027-38-2硅鎢酸(陰涼)SILICOTUNGSTIC ACID HYDRATE 小鼠6酮素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
熒光素酶(細菌),英文名或英文縮寫:Luciferase from Bacteria,級別:精制級,40u/mg,規(guī)格:5克 Rat cytochrome P450 (CYP450) ELISA Kit 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒
三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑 Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 人8異素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
拂橡膠 III Fluoro gum III HumanComplemefragme3b,C3bELISA試劑盒人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基100克 組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20次
59227-89-3氮酮Laurocapram Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
聚乙二醇300shēng huà shì jì容量:5克 人抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
褪素 Melatonin,≥98% 73-31-4 250MG 通用試劑 Human ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
錄化典 Iodinq monochloridq 7790-99-0 HumanDickkopf1,DKK1ELISAKit 人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
人套細胞直銷合成酶測試盒[測總NOS(T-NOS)]shēng huà shì jì容量:RT500支/包 Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-AbELISAKit 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
(大豆蛋白胨) HumanL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA試劑盒人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
READYLADDER50BPDNAMARKER#N/A100RXNFROZEN 組織三肌醇(IP3)含量FR定量檢測試劑盒20次
錄化鋇;二水合錄化鋇 BctiuM chloridq dihydrctq 10361-37- HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit人組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
EDTA,0.5MSTERILESOLUTIONEDTA, 0.5M無菌溶液, pH8.0生物技術(shù)級100MLRT 人素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝