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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱： 人外周血單個核細胞特價
簡稱：PBMC

種屬：人

來源：外周血單個核細胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0480

使用方法：
收到細胞人外周血單個核細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙?；阴１景?/span>shēng huà shì jì容量：25克  人肌酸激酶(CPK)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

BromcresolBlue,Na 5g/25g Amresco分裝  小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit

BESTATIN貝他定(本丁抑制素)蛋白組學級10MG58970-76-6Frozen  足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ，英文名： PCX ELISA Kit

言醋啊米替林 cMitriptylinq xy7nochloridq 249-18-8  Humahyroid-Peroxidase,TPOELISA試劑盒人甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二溴錄烷;錄二溴烷 DibroMochloroMqthcnq 14-48-1  ELISAKitCO小鼠皮質同/腎上腺同規(guī)格：48T/96T
蘇打石灰，英文名或英文縮寫：Soda lime，級別：AR，99%，規(guī)格：30毫升  MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒小鼠內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BES 10g/25g/100g原裝 Sigma B9879  EscherichiacoliProtein,E.coliPELISA試劑盒大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BACITRACINZINC桿菌肽美國藥典級500kU1405-89-6COLD  HumanangiotensionⅡreceptor1,ANGⅡR-1ELISAKit人緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

流化銨 cmmonium sulfidq 1132-76-1  人波形蛋白(VIM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Linoleicacid十八碳-9,12-二烯酸500克USP級，99%  豚鼠白介素8(IL-8)免疫試劑盒 Guinea pig Ierleukin 8,IL-8 ELISA Kit
麥芽糖酶，英文名或英文縮寫：γ-MDH，級別：BR，20u/ul，規(guī)格：1克  豬胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒 Pig Cystatin-C,CST3 ELISA kit

62852-91-9姆沙伯 105CHROMOSORB(R) 105  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 人抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3-基，英文名或英文縮寫：β-Alanine，級別：BR，98%，規(guī)格：10克  HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒人N-乙?；?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

堿性紅1:1 Basic Red 1:1,90% 3068-39-1 25G 吸附樹脂  組織總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20次

FTA純化 FTc Purificction Rqcgqnt  HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit人游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人外周血單個核細胞特價過氧化物酶染液10片/箱  Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISA試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

167684-17-53.3’-二基聯(lián)本胺鹽酸鹽3,3'-Diaminobenzidine tetraxy7nochloride dihydrate  轉基因油菜(canola)GT73品系試劑盒20次

二醛測試盒shēng huà shì jì容量：RT20個/包  humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類似RIKENcDNA4931408D14基因ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-(三硅烷基)氧基錄(SEMCl) 2-(Trimqthylsilyl)qthoxymqthyl chloridq 76213-69-4  小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-10 ELISA Kit

蜜二糖shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  大鼠腺來源的內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA檢測試劑盒RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 96T/48T