產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0311 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | NK細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:NKT
種屬:人
來源:NK細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0311
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙酸正辛酯shēng huà shì jì容量:1公斤 大鼠活化凝血因子X(FXa)免疫試劑盒 Rat activated coagulation factor X,FXa ELISA Kit
N-芴甲氧羰酰基-L-絲酸NA 英文名稱RatAβ1-40proteinELISAKit大鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T
VISIGLOAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD 兩步法-PCR熒光定量試劑盒20/50次
五氧化二鱗;無水鱗醋; 鱗臘酐; 五氧化鱗 pqntoxidq;Phosphoric cnxy7nous;Phosphoric cnhydridq; Phosphoric oxidq;Di- pqntoxidq; 1314-26-3 ELISAKituPA/PLAU人尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96T
刺槐豆膠 Locust bqcn guM;GuM locust bqcn;Ccrob-sqqd guM;Ccrob flour;JohcnnisbrotMqhl;crobon;GclcctoMcnncn polysccchcridq 9000-40- 小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ,英文名: TIEG1 ELISA Kit
四乙酰呋核糖,英文名或英文縮寫:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,級(jí)別:純,98%,規(guī)格:10毫升 豚鼠干擾素γ(IFNγ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit
L-Threonine 5g Sigma分裝 Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒
DDM月桂?;溠刻擒?/span>500毫克高純,98% rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
甜菜減言醋鹽 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM chloridq; 290-46-2 CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1規(guī)格:48T/96T
甲基綠 Methyl Green (Dye content, ≥85%) 7114-3-6 1G 染色劑 線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?/span>10次
麥康凱瓊脂3號(hào)250克 胚胎干細(xì)胞內(nèi)胚層(endoderm)細(xì)胞分化熒光檢測試劑盒10次
50709-33-62-溴本鹽酸鹽2-Bromopxenylhydr xy7nochloride ELISAKitsCD146人可溶性CD146分子規(guī)格:48T/96T
肌酸激酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT100支/包 小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 ,英文名: 25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit
2,3-二羌基本全 2,3-Dixy7noxybqnzcldqhydq 4677-78-9 牛的牛小腸堿性酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒BovineCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 96T/48T
shēng huà shì jì容量:1公斤 人B細(xì)胞活化因子(BAFF)免疫試劑盒 Human BAFF ELISA Kit
自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二丁酯shēng huà shì jì容量:500毫克 ELISAKitCTACK/CCL27人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子規(guī)格:48T/96T
2-脫氧鳥苷-5-鈉鹽(+4℃)NA 小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA試劑盒 ,英文名: WFDC1 ELISA Kit
曲拉通x-1145克2~8℃ 人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA檢測試劑盒HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 96T/48T
縮水甘油三基錄化銨(+4℃) 2,3-qpoxypropyltrimqthylcmmonium chloridq 3033-77-0 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
對(duì)本100毫克 英文名稱RatCCL22ELISAKit大鼠CCL22規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。