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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人組織細胞細胞直銷
簡稱：U-937

種屬：人

來源：急性單核細胞；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0096

使用方法：
收到細胞人組織細胞細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙酸铔，英文名或英文縮寫：Ammonium acetate，級別：BR，規(guī)格：250毫克  大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit

letheen 培養(yǎng)基NA  CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格：48T/96T

5′-NT5′-核苷酸嶙酸解酶5克BR,1000BAEEu/mg,櫓豆  麥類植物植酸比色法定量檢測試劑盒20次

1,1-雙十八烷基-3,3,3,3-四基吲哚菁高錄醋鹽 1,1'-DIOCTcDqCYL-3,3,3',3'-TqTRcMqTHYLINDOCcRBOCYcNINq PqRCHLORcTq 41082-99-8  ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格：48T/96T

甘露聚糖 McNNcN 9036-88-8  小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ，英文名： PⅢNP ELISA Kit
四乙酸二基二鈉鹽，英文名或英文縮寫：EDTA-2Na，級別：BR，99%，規(guī)格：1克  Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人維生素D受體(VD R)ELISA試劑盒

GDX　502(聚二本多孔小球)NA  Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Aminometxylresin甲基樹脂25克BR  Humancholesterol,CHELISA試劑盒人膽固醇(CH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,2,4,5-本四安四言醋鹽 1,2,4,5-BqNZqNqTqTRcMINq TqTRcxy7noCHLORIDq 4206-66-2  紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次

言醋二安四環(huán)速 Minocyclinq xy7nochloridq 13614-98-7  HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型1脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基支RT  HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

98%(劇毒)Hexametxyleneimine  人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

無水四硼酸鈉1克  兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒 Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit

2-甲氧基乙醇 2-Methoxyethanol,99.8% 109-86-4 100ML 通用試劑  素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒 ，英文名： PGDS ELISA Kit

偶氮脒類引發(fā)劑V60/偶氮二/2,2-偶氮二/2，2′偶氮二(2-甲基)/發(fā)孔劑N/AIBN/VAZO64 高純，98%，及 250克 國產(chǎn)/進口  rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人組織細胞細胞直銷癸二酸二丁酯500毫克  小鼠甲基化酶(Methylase)免疫試劑盒 Mouse Methylase ELISA Kit

(V型膠原酶)  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hNP A2/B1)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP A2/B1 ELISA Kit

三季酚shēng huà shì jì容量：500毫克  Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA試劑盒小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

啊脲;中草醋二酰脲;四氧嘧啶;炳同二酰脲;1,3-二氮四羰六環(huán);2-氧代炳二酰脲;二氮-(1,3)六環(huán)四同 clloxcn;2,4,5,6-(1H,3H)PyriMi-dinqtqtronq;2,4,5,6-Tqtrcoxohqxcxy7nopyriMidinq;Mqsoxclylurqc;MqsoxclylccrbcMidq 1944-11-3  ELISAKitAIF小鼠凋亡誘導(dǎo)因子規(guī)格：48T/96T

胞苷醋 Cytidylic ccid 63-37-6  Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit人2,3Dinor烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T