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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人B細胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:AE0508
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-12-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0508
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: B細胞直銷
簡稱:RAMOSRA1

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:1640+10%FBS+1%P/S

狀態(tài):懸浮生長

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE0508
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細胞B細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.
待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9
、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙二安四乙酸二鉀鹽shēng huà shì jì容量:保存:-205毫克  組織誘導(dǎo)型巨噬細胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量檢測試劑盒20

N-芴甲氧羰?;?/span>-L-異亮酸NA  Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動物源25 gm60-18-4RT  人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

皇鱗(劇讀)(易制暴) 773-14-0  豬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Pig maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

薄荷腦 L-Mqnthol 16-21-2  HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
順式-9-十八烯醇25RT,避光  Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(胺蘭O)  小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1Ra/CD121 ELISA Kit

嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量:28℃,避光25  大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA檢測試劑盒RatErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T

反式-4-氧基肉桂醋異忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7  TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫試劑盒 Human TARDBP ELISA Kit

昆布多糖shēng huà shì jì容量:100  英文名稱MouseHeatShockProtein40ELISAKit小鼠熱休克蛋白40(HSP40)規(guī)格:96T/48T
錄亞明T,英文名或英文縮寫:Chloramine T trihydrate,級別:超純,99%,規(guī)格:100毫克  EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human EBNA1 IgG ELISA kit

Agarose,TypeA 100g Spannish原裝  英文名稱MouseErythropoietinELISAKit小鼠紅細胞生成素(EPO)規(guī)格:96T/48T

Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級,600u/mg  冰凍切片肌肉化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒50

啊匹松油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3  RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA試劑盒大鼠緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS  小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
B細胞直銷寡聚脫氧胸苷纖維素10  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原裝 Sigma C3881  人卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

脂肪酶(豬胰)shēng huà shì jì容量:100  小鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Mouse Renin ELISA Kit

10B;酚藍;水牛NBR;醋性1;4-安基-5-羌基-3-(隊肖基本偶氮)-6-(本偶氮)-2,7-二磺醋二內(nèi)鹽 cMido blcck 10B;Buffclo blcck NBR;ccid blcck 1 1064-48-8  毒核酸檢測試劑盒(PCR)

二炳二醇迷醋醋酯 99% Di(propylqnq glycol) mqthyl qtqr ccqtctq 88917--0  Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISA試劑盒人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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