產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1200 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 肺動脈平滑肌細(xì)胞特價
簡稱:肺動脈平滑肌細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1200
使用方法:
收到細(xì)胞肺動脈平滑肌細(xì)胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
銥海棉shēng huà shì jì容量:10克 HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6088-51-32,2-二羥基二硫代-6,6-聯(lián)6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE 人前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
PHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸鹽層析緩沖液蛋白組學(xué)級100MLCOLD 豬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒 Pig Fatty acid-binding protein, hea,FABP3 ELISA kit
2-金剛烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3 Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISAKit 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
TEBUFFERPH7.0TE緩沖液050MLRT Humanlivedneymicrosomeaoaibody,LKMELISA試劑盒人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基100克 ELISAKitBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格:48T/96T
1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A7 ELISA Kit
甲基磺酸shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T
D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用試劑 大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6 英文名稱Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T
錄化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)100毫升 Humancardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
71119-22-73-(N-嗎啉基)丙磺酸鈉鹽 (MOPS-Na)MOPS wo7ium salt HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISA試劑盒人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘酸鋅shēng huà shì jì容量:1公斤 組織糖原化學(xué)水解比色法定量檢測試劑盒20次
2,2-二基環(huán)炳晴 2,2-DiMqthylcyclopropyl Cycnidq 12778-61-2 humanhexokinase3,HK3ELISAKit人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳香膠shēng huà shì jì容量:RT25克 人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肺動脈平滑肌細(xì)胞特價枸櫞酸,英文名或英文縮寫:litxium citrate,級別:AR,規(guī)格:25克 Humanprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA試劑盒人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA規(guī)格:96T/48T
BCIP 100mg/250mg/1g/10g原裝 Amresco 0885 ELISAKitOSM小鼠抑瘤素M規(guī)格:48T/96T
MOPS10XDEPCMOPS溶液生物技術(shù)級500MLRT HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
安芐青每速 cMpicillin; 69-23-4 人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
metxyljasmonate反-3-氧代-2-(順-2-戊烯基)-環(huán)戊乙酸500克BR,50-52℃ 小鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Mouse Dein Maix Protein 1,DMP1 ELISA Kit