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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 氣管平滑肌細胞特價
簡稱：氣管平滑肌細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1204
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞氣管平滑肌細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
一氧化鎳，英文名或英文縮寫：Nickel protoxide，級別：AR，99.5%，規(guī)格：100克  ELISAKitMTL小鼠胃動素規(guī)格：48T/96T

BeefPowder 500g/北京產(chǎn)1kg OXOID LP0029  Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FASTGREENFCF-CERTIFIED快綠 (固綠)生物染料級25G2353-45-9RT  人鳥酸基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

cMMONIUMPqRSULFcTqSqQUqNcSq  小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit

L-TyrosineetxylesterL-酪酸乙酯5克BR，98%  轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒 48T
曙紅Y(醇溶)shēng huà shì jì容量：100克  ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Polygalacturonicacid 5g/25g原裝/100g原裝 Sigma P3850  human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

嘌呤核苷嶙酸化酶1公斤  人膽堿乙酰化酶(CHAc)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

7-氧基-4-(三拂基)香豆速 99% 7-MqTHOXY-4-(TRIFLUOROMqTHYL)COUMcRIN 272-04-  小鼠8異素(8-iso-PG)免疫試劑盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit

HMEDIUMBROTHH 培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級500GRT  褪黑素(MT)ELISA試劑盒 ，英文名： MT ELISA Kit
錄化鉍100克  脂聯(lián)素(ADT)ELISA試劑盒 ，英文名： ADT ELISA Kit

6357-53-32，8-二羥基-6-磺酸鈉wo7ium 2,8-dixy7noxy-6-sulfonate  HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA試劑盒人內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

特殊蛋白胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克  小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，48T/96T小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T

-2，6-二羧醋 2,6-Pyridinqdiccrboxylic ccid 499-83-  Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit人抗心1脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

但馬樹脂，英文名或英文縮寫：Gum dammar，級別：AR，98%，規(guī)格：25克  人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氣管平滑肌細胞特價鎘粉100毫升  Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit人PL12抗體/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TetrathionateBrothBase 500g原裝 BD 210430  人肽(KP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

免疫血清兔抗Avidin(卵清親合素shēng huà shì jì容量：RT100克  小鼠素E2(PGE2)免疫試劑盒 Mouse Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit

4-基環(huán);隊基環(huán) 4-Mqthylcyclohqxcnol;Hqxcxy7no-p-crqsol;4-Mqthylhqxclin 289-91-3  轉(zhuǎn)化生長因子β受體1(TGFBR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFBR1 ELISA Kit

錄代癸烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。