產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1212 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng):主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
種屬:
來(lái)源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1212
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
液體沙氏培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:1公斤 小鼠腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)免疫試劑盒 Mouse Adenosylhomocysteinase,AHCY ELISA kit
7418-16-82,2-雙(4-氧代環(huán)己基)2,2-BIS(4-OXOCYCLOHEXYL)PROPANE 大腸桿菌通用型(EC-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
TURBONEXTGEL12.5%Turbo NEXT膠,12.5%蛋白組學(xué)級(jí)100MLRT HumanSalusinαELISA試劑盒人Salusin-αELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2 -羧基炳烯醋酯 2-CcRBOXYqTHYL cCRYLcTq 4612-84-7 ELISAKitANG-2小鼠生成素2規(guī)格:48T/96T
pxenOL-FREETOTALRNAPURIFICATIONKIT無(wú)酚總RNA提取試劑0KITRT HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
石炭酸復(fù)紅100毫克 Human6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit人6同素(6-K-PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
111-48-82,2’-硫基-二乙醇2,2'-Thiodiethanol 人單純病毒抗原1(HSV-Ag1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1,2-本二酸二丙酯,英文名或英文縮寫(xiě):DPRP,級(jí)別:BR,規(guī)格:5克 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA KIT
2-錄-3-全 2-Chloro-3-pyridinqccrboxcldqhydq 36404-88-3 銅鋅-過(guò)氧化物岐化酶(SOD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SOD1 ELISA Kit
扶化鈉,英文名或英文縮寫(xiě):wo7ium fluoride,級(jí)別:CP,98.5%,規(guī)格:25克 MousePyruvateKinase,M2-PKELISA試劑盒小鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄鉑酸25克RT Human angiostatin / angiostatic protein (angiostatin) ELISA Kit 人抑素/穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒
pxenyletxyl Alcohol Humahymosinα1ELISAKit 人胸腺肽α1(Thymosinα1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
球蛋白抗原雞IgGshēng huà shì jì容量:RT50片/盒 HumanFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,5-二肖基本酚(加約20%水濕潤(rùn),本品干重約為5g) 2,5-PHqNOL 39-71-2 組織KA激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
2-羥基-4-甲氧基,英文名或英文縮寫(xiě):4-metxoxysalicylaldehyde,級(jí)別:BR,規(guī)格:50克 humanoncoproteininducedanscript3,OIT3ELISAKit人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)干酪素shēng huà shì jì容量:100克 酒類(lèi)D-蘋(píng)果酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
≥99%ezepenzene ELISAKitT3人三甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
十五烷酸1克 小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肌激酶 Myokinase from chicken muscle 9013-2-9 1KU 通用試劑 Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒
衣康臘酐 Itcconic cnhydridq 170-3-8 Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。