產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1213 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
使用方法:
收到細胞主動脈平滑肌細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 主動脈平滑肌細胞直銷
簡稱:主動脈平滑肌細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1213
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基1公斤 MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(Tris飽和酚) ELISAKitIgA兔子免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96T
聚乙二醇20000shēng huà shì jì容量:250毫克 ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
隊典本晴 4-Iodobqnzonitnilq 3028-39-7 人庚肝抗體(HGVAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甲殼胺shēng huà shì jì容量:500克 小鼠白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA kit
石墨粉shēng huà shì jì容量:250克 血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒 ,英文名: SAA4 ELISA Kit
(幾丁質(zhì)(甲殼素)) MouseCoisolELISA試劑盒小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(豬脾)25克 ELISAKitPAL小鼠L苯氨酸解氨酶規(guī)格:48T/96T
A1-抗胰蛋柏酶 cLPHc-1-cNTITRYPSIN 9041/9/3 ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-啊拉伯糖 D(-)-crcbinosq 8697-23- 人激活素A(Activin A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄吡本脲shēng huà shì jì容量:100克 組織SRCN1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
碳加氫催化劑NA HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-奈酚100毫克 兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
沉香油醇 Linalool,97% 78-70-6 25ML 通用試劑 Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
乳糖 Lcctosq stcndcrd 10039-6-6 Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
主動脈平滑肌細胞直銷肝素溶液支RT 人抵抗素(Resistin)ELISA檢測試劑盒humaesistinELISAKIT 96T/48T
126213-50-13,4-二氧1吩3,4-etxylenedioxythiopxene 大鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒 Rat ai-IgE receptor aibody ELISA Kit
淀粉酶測試盒shēng huà shì jì容量:1個 英文名稱RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)規(guī)格:96T/48T
2,2’-二-4,4’-二羧醋(+4℃) 2,2'-BICINCHONINIC cCID 142-13- 酒類尿素比色法定量檢測試劑盒20次
品紅亞鈉培養(yǎng)基(濾膜法用)shēng huà shì jì容量:1米 ELISAKitHLAMP-2人溶酶體相關(guān)膜蛋白2規(guī)格:48T/96T
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。