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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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平滑肌細(xì)胞特價
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE1216
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-12-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE1216
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 平滑肌細(xì)胞特價
簡稱:平滑肌細(xì)胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE1216
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞平滑肌細(xì)胞特價后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
氧化鍺shēng huà shì jì容量:RT25  豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit

128-53-0N-乙基順二;N-乙基失水蘋果;N-乙基馬來N-etxylMaleiMide;NEM;  Humancytotoxin,CTXELISAKit 人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

PROCASPASE-3ACTIVATORPROCASPASE-3 活化劑10MGCLD PL-COLD  Humanleukocyteexastase,HLEELISA試劑盒人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1,5-戊二醇 1,5-Pentanediol,97.0% 111-29-5 100ML 通用試劑  組織牛病毒I(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20

L-亮安醋芐酯隊本磺醋鹽 L-Lqucinq bqnzyl qstqr p-toluqnqsulfonctq sclt 1738-77-8  humanImmunoglobulinEIgEELISAKit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十四烷shēng huà shì jì容量:1  Human hepatitis B virus S2 aigen (HBV preS2Ag) before ELISA Kit 人病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒

97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside  Humaissueinhibitorofmetalprotease1,TIMP-1ELISAKit 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

蔗糖酶1RT  Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISA試劑盒人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

N,N,N,N-四甲基胍 1,1,3,3-Tetramethylguanidine,99% 80-70-6 5ML 通用試劑  組織甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20

木速(脫減) LIGNINq 9002-23-  Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease,MASPELISAKit人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
魯米諾shēng huà shì jì容量:100毫克  熱休克蛋白72(HSP-72)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-72 ELISA Kit

134-11-22-乙氧基本;鄰乙氧基本;水楊酸2-Ethoxybenzoic acid;o-Ethoxybenzoic acid;Salicylic acid etxyl   Procinehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA試劑盒豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

十六醇shēng huà shì jì容量:保存:-2050毫克  Humanai-cailage-aibodyELISA試劑盒人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2,2'-二基二苯硫醚 2,2-Diaminophenylsulfide,98% 5873-51-8 5G 通用試劑  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKitBH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

氘代二亞砜 DIMqTHYL SULFOXIDq-D6 2006/7/1  人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
平滑肌細(xì)胞特價肝素抗凝管shēng huà shì jì容量:RT  豚鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Guinea pig Renin ELISA Kit

(四硼酸鈉糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒 ,英文名: GAG ELISA Kit

丁二酸  MouseThioredoxin,xELISA試劑盒小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

隊本硼醋 4-Tolylboronic ccid 270-2-8  Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

寡霉素1公斤  Humanaldehydedehydrogenase,ALDHELISAKit人乙脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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