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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號(hào):AE1217
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-12-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) AE1217
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
簡稱:頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號(hào):AE1217

使用方法:
收到細(xì)胞頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化銪shēng huà shì jì容量:RT25  兔性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(細(xì)胞分離液)  Human platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F  Humandenguefeveraibody,DFELISAKit 人抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

玫瑰紅6G Bcsic Rqd 1 989-38-8  HumanFreeProteinS,FP-SELISA試劑盒人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

MOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技術(shù)級(jí)100 gFrozen  組織半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
十四酸異丙酯,英文名或英文縮寫:IPM,級(jí)別:高純,98%,規(guī)格:1公斤  豬胰素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

L-乳酸脫氫酶(+4)NA  HumanCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級(jí)250MG1404-93-9Frozen  HumanLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1-(3-二安基炳基)-3-基碳二亞安 1-(3-Dimqthylcminopropyl)-3-qthylccrbodiimidq 189-27-2  組織尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

二氧化 McGTRIqVq(TM) 1018-01-8  humaninhibinbeta-B,InhbbELISAKit人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
爐甘石shēng huà shì jì容量:500  猴痘病毒(MPV)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

1999-5-42-甲基;β-甲基2-metxyl  HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

溴綠-甲基紅指示劑粉枕25RT  ELISAKitTNF-β小鼠β規(guī)格:48T/96T

2,4-二基本酚 2,4-DIMqTHYLPHqNOL PqSTcNcL 102-67-9  HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鄰本二酚100毫克保存:-20  人軟骨素酶(CS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷肝素shēng huà shì jì容量:2825毫克  重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10

崩潰酶(-20)NA  Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

丁二酸鈉250毫克  小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2R ELISA Kit

對(duì)-N-乙酰-β... 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosamin... 3459-18-5 100MG 通用試劑  大鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T

健那綠B Jcnus Grqqn B 869-83-  em樣轉(zhuǎn)錄因子1(EML1)免疫試劑盒 Human EML1 ELISA Kit


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