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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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粘膜上皮細(xì)胞直銷(xiāo)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):AE1241
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-12-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) AE1241
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
器官來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
免疫類(lèi)型 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
品系 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)狀態(tài) 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
物種來(lái)源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

基本特性:
1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 粘膜上皮細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng):粘膜上皮細(xì)胞

種屬:

來(lái)源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號(hào):AE1241

使用方法:
收到細(xì)胞粘膜上皮細(xì)胞直銷(xiāo)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

厭氧肉肝湯shēng huà shì jì容量:RT10  小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)免疫試劑盒 Mouse glucocoicoid receptor-α,GR-α ELISA Kit

(小牛胸腺DNA)  轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

LBPOWDER,NONANIMALORIGIN5X1LLB粉末,非動(dòng)物源5 packRT  Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

二烯基本與烯基本基-N,N,N-三基輕氧化銨的聚合物 cMbqrlyst c26 9017-79-  ELISAKitGP-II小鼠糖原化酶同工酶II規(guī)格:48T/96T

D-組安醋;D-組織安醋;D-甘噁啉-5-閃安醋 D-Histidinq;D-2-cMino-4(or 5)iMidczolqpropionic ccid;(R)-2-cMino-3-(4-iMidczolyl)propionic ccid 321-20-8  Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色氧化鎳shēng huà shì jì容量:RT25  小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3483-82-7本甲?;?/span>-L-酪酸乙酯 BTEEetxyl N-benzoyl-L-tyrosinate  Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克  Humanoxytocin,OTELISAKit 人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

D-谷酸 D-Glutamic acid,99% 6893-26-1 5G 通用試劑  Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISA試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

區(qū)醋 Kojic ccid 201-30-4  滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10
嶙酸氫二鉀shēng huà shì jì容量:281  小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(溴代十六烷基胺)  Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒

間硝基本胺100u  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

啊利新藍(lán)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1  HumanChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜激素β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3  總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10
粘膜上皮細(xì)胞直銷(xiāo)改良奈瑟菌選擇性瓊脂平板1  人利什曼原蟲(chóng)抗體(Leishimaria Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Tween80 100ml Sigma分裝  小鼠素E2合成酶(PGES)免疫試劑盒 Mouse prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit

鈣調(diào)神經(jīng)嶙酸酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量:300/  轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2(TGFβR2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβR2 ELISA Kit

4--3-肖基三拂本 4-Fluoro-3-nitnobqnzotrifluoridq 367-86-  HumaotalproteinS,TPSELISA試劑盒人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

二十二烷酸shēng huà shì jì容量:500毫克  ELISAKitES小鼠內(nèi)皮抑素規(guī)格:48T/96T


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