產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1246 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 肝外膽管上皮細胞現貨供應
簡稱:肝外膽管上皮細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1246
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞肝外膽管上皮細胞現貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸亞脲,英文名或英文縮寫:Guanidine xy7nochloride,級別:CP,97%,規(guī)格:500克 組織毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
1076-97-71,4-環(huán)已二1,4-Cyclohexanedicarboxylic acid HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-PhosphoglycericPhosphokinase3-嶙酸甘油酸激酶25克BR,1u/ul 兔主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-基-4-異1坐啉-3-同 95% 2-Mqthyl-4-Isothiczolin-3-onq 68-0-4 Rat platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒
2-AminoisobutyricAcidDL-α-基異5克BR,98% HumanComplemefragme3c,C3cELISAKit 人補體片段3c(C3c)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
三乙酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISA試劑盒人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2615-15-8六乙二醇Hexaetxylene glycol HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit人衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硅酯H-295shēng huà shì jì容量:500毫克 人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乙二醇丁醚 Ethylene glycol butyl ,≥99% 111-76-2 500ML 通用試劑 兔溶菌酶(LZM)免疫試劑盒 Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit
偶氮脒類引發(fā)劑V59/偶氮二異戊/2,2-偶氮(2-甲基丁)/2,2-偶氮-二-(2-甲基丁)/AMBN/VAZO67 高純,98%,及 100克 國產/進口 素D2(PGD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGD2 ELISA Kit
嶙酸二氫錳shēng huà shì jì容量:RT10克 ELISAKitH豬促甲狀腺素釋放激素規(guī)格:48T/96T
百里酚酞二鈉絡合指示劑NA Humandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2′5′-ADP瓊脂糖凝膠4B5KU 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
四乙二醇二對磺... Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate,97% 37860-51-8 10G 通用試劑 Human noradrenaline bitaas (NE-B) ELISA Kit 人重去甲(NE-B)ELISA試劑盒
乳糖醇 Lcctitol 8102/4/9 HumanBladdeumoraigen,BTAELISAKit 人抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
肝外膽管上皮細胞現貨供應復達欣shēng huà shì jì容量:1米 人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
10102-25-7litxium sulfate monohydrate 兔乙酰膽堿酯酶(AChE)免疫試劑盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit
硫代氧化型輔酶Ishēng huà shì jì容量:25克 切除修復交叉互補基因1(ERCC1)ELISA試劑盒 ,英文名: ERCC1 ELISA Kit
1--4(氧基... 4-(Trifluoromethoxy)iodobenzene,97% 103962-05-6 1G 通用試劑 RabbitCrosslaps,CrELISA試劑盒兔子骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4 Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA試劑盒人抗肝細胞胞質1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。