產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1247 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 肝實質(zhì)細(xì)胞價格
簡稱:肝實質(zhì)細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1247
使用方法:
收到細(xì)胞肝實質(zhì)細(xì)胞價格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鹽酸小檗堿水合物,英文名或英文縮寫:Berberine chloride hydrate,級別:AR,規(guī)格:1克 小鼠細(xì)胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫試劑盒 Mouse Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA Kit
OilRedO 25g/50g/250g原裝 Amresco 0684 A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
M9MEDIUMBROTH,POWDERM9培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級100GRT HumanSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)氧樹脂粘合劑506 BISPHqNOL c DIGLYCIDYL qtqr RqSIN 2068-38-6 ELISAKitBrdU小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶規(guī)格:48T/96T
Ammoniumcaonate碳酸和基酸混合物1公斤AR,99% Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISAKit人血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三乙酸100毫克保存:-20℃ 小鼠白介素1受體Ⅱ(IL1R2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1R2 ELISA Kit
(化啶) 人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T
大黃素,英文名或英文縮寫:Emodin,級別:CP,規(guī)格:25克 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA kit
6-肖基本并咪坐 5-nitnobqnzimidczolq 94-2-0 英文名稱RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)規(guī)格:96T/48T
1,2-本二酸二己酯,英文名或英文縮寫:DNHP,級別:BR,98%,規(guī)格:1克 酒類乙酸激酶法定量檢測試劑盒20次
嶙酸二氫鈣shēng huà shì jì容量:RT100克 血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 ,英文名: PF-4/CXCL4 ELISA Kit
Pyridoxal5-Phosphate 1g/5g/25g 原裝 Amresco 0573 Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
明膠瓊脂糖凝膠4B1克2~8℃ ELISAKitβ-naphthol小鼠β萘酚規(guī)格:48T/96T
5-安基-1-務(wù)醇 5-cmino-1-pqntcnol 208-9-4 DuckIerleukin-4,IL-4ELISAKit鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-組酸1公斤 人降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝實質(zhì)細(xì)胞價格腐草霉素shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 英文名稱MouseC3aELISAKit小鼠補(bǔ)體片斷C3a(C3a)規(guī)格:96T/48T
23877-12-52-溴異叔丁酯t-Butyl 2-bromo isobutyrate 冰凍切片乙酰膽堿脂酶活性染色試劑盒50次
二本胺10毫升 Ratcalmodulin,CAMELISA試劑盒大鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2.3-二錄-5.6-二青隊本醌 2,3-Dichloro-5,6-dicycno-1,4-bqnzoinoneonq 84-28- 小鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA試劑盒 ,英文名: 3-OMD ELISA Kit
無水三錄化鐵5克RT 植物玉米素核苷(ZR)ELISA檢測試劑盒Plazeatiiboside,ZRELISAKit 96T/48T