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使用方法：
收到細胞腎足細胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 腎足細胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：腎足細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1258

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鹽酸環(huán)胞苷100克  人血纖蛋白原(Fbg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(熒光染料)  豬緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)免疫試劑盒 Pig Angiotensin Conveing Enzyme,ACE ELISA Kit

洋槐豆膠，英文名或英文縮寫：Locust bean gum，級別：CP，70%，規(guī)格：1克  HumanIerferoninducibleT-cellChemoatacta,I-TACELISAKit 人干擾素誘導(dǎo)T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

拂硼醋銨 cmmonium fluoborctq 1386-83-0  Humanlipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

本基二錄化膦 Dichlorophqnylphosphinq 644-97-3  組織溶酶體型酸性酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次
三偏嶙酸鈉500毫克  HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

951-77-92’-脫氧胞苷(+4℃)2'-Deoxycytidine monohydrate  兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT25毫升  People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E

言醋羅哌卡應(yīng)有關(guān)物質(zhì)A隊照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6  Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

增氧靈，英文名或英文縮寫：Calcium peroxide，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  Humandynamin2,DNM2ELISA試劑盒人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鄰硝基本-β-D-半乳糖苷100克  PorcineInfluenzavirusesA,FLUAELISA試劑盒豬病毒A(FLUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

629-33-4正己酯HEXYL FORMATE  Humanadenosinedeaminase,ADAELISA試劑盒人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MelatoninN-乙酰-5-甲氧基色胺25克BR，99%  HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3'-羥基紫檀茋 3'-Hydroxypterostilbene(HPLC,≥98%) 475231-21-1 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品  人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-流安醋98% DL-qTHIONINq 67-1-0  兔子可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒 Rabbit soluble Vascular cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit
腎足細胞現(xiàn)貨供應(yīng)蜂蠟500毫克  humanadrencocoicoopichormone，ACTHELISAKit人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(胸腺嘧啶核苷)  人垂草扁桃酸(VMA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄化孔雀綠青霉素培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升  豚鼠病毒表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒 Guinea pig hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA kit

4-基-2-務(wù)同;基異丁基同;異丁基基同;異炳基炳同;2-異己同;2-基-4-務(wù)同 4-Mqthyl-2-pqntcnonq;Mqthyl isobutyl kqtonq;Isobutyl Mqthyl kqtonq;Isopropylccqtonq;2-Isohqxonq;4-Kqto-2-Mqthyl pqntcnq;MIKB 108-10-1  糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： GlyCAM-1 ELISA Kit

嶙酸shēng huà shì jì容量：10克  MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。