產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1277 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 精原細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱:精原細(xì)胞
種屬:
來(lái)源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1277
使用方法:
收到細(xì)胞精原細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
亞硝基-R-鹽,英文名或英文縮寫:nitnoso R salt,級(jí)別:BS,規(guī)格:25克 人表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鮮素鉀鹽,英文名或英文縮寫:Maleic hydrazide potewwium salt,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:25毫克 四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ,英文名: BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑 Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
固暗藍(lán)R鹽;堅(jiān)牢深藍(lán)R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195; GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸過(guò)氧化物酶shēng huà shì jì容量:1克*5 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Polypeptone 250g/1kg 國(guó)產(chǎn) Rat platelet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD6 a GP- II 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6
磺胺100克 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
6-羌基多巴安輕溴醋鹽 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0 HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISA試劑盒人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 測(cè)序緩沖液 (1X 帶顏色)測(cè)序級(jí)1LRT 組織β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
亮酸基肽酶1克2~8℃,避光 異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 ,英文名: SYNCRIP/HPQ/NSAP1 ELISA Kit
Piperacillin 1g原裝 INALCO1758-9170 Mousealkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒小鼠堿性酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁基羥基,英文名或英文縮寫:BHA,級(jí)別:CP,99%,規(guī)格:1克 ELISAKiesistin小鼠抵抗素規(guī)格:48T/96T
芴同 9-Fluorqnonq 486-2-9 Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
電解,英文名或英文縮寫:Lead,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:25克 人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
精原細(xì)胞直銷放現(xiàn)菌肉湯培養(yǎng)基支RT 犬轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
(魚精DNA) 英文名稱MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1規(guī)格:96T/48T
低熔點(diǎn)瓊脂糖shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 冰凍切片組織細(xì)胞色素C氧化酶表達(dá)免疫熒光檢測(cè)試劑盒10/20次
軟骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9 ratEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-蘋果酸 DL-Malic acid (≥98%) 6915-15-7 25G 通用試劑 小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 ,英文名: CD5L ELISA Kit