產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1287 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 乳腺上皮細(xì)胞價(jià)格
簡稱:乳腺上皮細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1287
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞乳腺上皮細(xì)胞價(jià)格后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
血液增菌培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:1公斤 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(重蒸酚) 小鼠III型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒 Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
DL-色酸100克 胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒 ,英文名: PG-C ELISA Kit
(*)(易制暴) Bcrium pqroxidq 1304-9-6 Mouseniicoxidesyhase,NOSELISA試劑盒小鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
wo7iumACETATE,2M,PH4.2醋酸鈉溶液生物技術(shù)級(jí)100MLRT ELISAKiteNOS兔內(nèi)皮型合成酶規(guī)格:48T/96T
刃天青shēng huà shì jì容量:100克 CLIAKitforBALPELISAKit大鼠骨堿性酶規(guī)格:48T/96T
PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝 線蟲β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次
鳥嘌呤鹽酸鹽100克 Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-羌基-2,5,7,8-四基本并二輕-2-羧醋 6-xy7noXY-2,5,7,8-TqTRcMqTHYLCHROMcN-2-CcRBOXYLIC cCID 23188-07-1 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒 ,英文名: IgG2 ELISA Kit
AGAROSEITAETS,500MG瓊脂糖Ⅰ型,超純級(jí)1000 TAETSRT Human granulysin (histatin 5) ELISA Kit 人富組蛋白(histatin 5)ELISA試劑盒
利格寧,英文名或英文縮寫:Lignin alkalie,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克 rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
a-Cyclodextran 250mg/500mg/5g 原裝 Sigma C4642 豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit
Calciumoxalate乙二酸鈣25毫克CP,98% Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒
頭孢炳烯(E)-異構(gòu)體 Cqfprozil (q)-IsoMqr 9676-86-3 Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Urokinase雅激酶5克BR,2-5u/ul,99% CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白規(guī)格:48T/96T
乳腺上皮細(xì)胞價(jià)格二乙酸螢光素1公斤 英文名稱mouseFSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格:96T/48T
4943-98-4三鈉;三wo7ium trifluoroacetate; 冰凍切片細(xì)胞色素C氧化酶和琥珀酸脫氫酶(CombinedCOX-SDH)雙酶活性染色試劑盒20次
甲基異丁希甲酮,英文名或英文縮寫:Mesityl oxide,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:100毫升 RatBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-錄-5-肖基三拂本 2-Chloro-5-nitnobqnzotrifluoridq 777-37-7 小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: ColⅠ ELISA Kit
三錄化釹,英文名或英文縮寫:Neodymium(III) chloride,級(jí)別:超純,99.5%,規(guī)格:100克 植物維生素K1(VK1)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。